免疫实习指导.pdf

免疫学实习指导 高晓明 主编 免疫学系 集体编写 北京大学医学部基础医学院免疫学系 2004 年 12 月 序 言 本实习指导内容的安排与免疫学理论课的内容相衔接，主要包括 免疫学的经典实验，即吞噬细胞吞噬功能检测、补体结合试验、T 淋 巴细胞转化试验、免疫标记技术（膜表面免疫球蛋白的检测、ELISA）、 溶血空斑试验、沉淀反应。细胞凋亡的检测为新增加的实验。 本指导旨在让学生在有限的时间内学到现代免疫学常用的实验方 法和技术，并使学生通过实验课的学习进一步认识和巩固课堂所学的 知识，同时培养学生的实际操作能力及分析问题、解决问题的科学思 维能力。 本指导适用于我校 8 年制、6 年制、5 年制的基础、医疗、预防、 口腔医学及护理、药学专业。不妥之处望指导教师和学生在使用过程 中坦诚指出，以利进一步改进。 1 实验室规则 一、 进入实习室实验要穿白大衣。 二、 除实验中必用的学习用品外，其他物品不要放在实验台上。书包 放桌屉内，衣帽挂衣架上。 三、 实习室内不允许吃食物或饮料，严禁吸烟。 四、 实验中一定要保持实习室安静，彼此讨论问题时不要大声喧哗、 严禁打闹。 五、 实验过程要按照教师要求进行操作，如有疑问要请教指导教师。 六、 爱护实验器材，如有损坏应及时报告教师，需赔偿者按规定办理。 七、 实验完毕，要清理台面。需冲洗的物品按要求冲洗，需收回的物 品按要求摆放整齐送回教学准备室。 八、 值日生要做好值日，离开实习室时，一定要有专人负责关好门窗、 水源及照明设备。 2 免疫学实验课授课进度 本授课进度供承担免疫学实验教学 （8 年制）任务的教师使用和参考，为保证实验课内 容充实，有些实验课的内容安排可能超过规定的学时数，希望任课教师能合理安排时间，必 要时，可将几个实验内容穿插进行，以保证教学进度。 1、单扩、双扩及免疫电泳（示教）共 2 学时 （1） 原理、试验方法及注意事项的讲解（15 分钟） （2 ） 双扩铺板和打孔（30 分钟） （3 ） 单扩打孔和单、双扩加样（30 分钟） （4 ） 电泳示教及原理讲解（15 分钟） （5 ） 小结 10 分钟 2 、溶血空斑试验——小室液相法（PFC ）和分析单扩和双扩结果 共 2 学时 （1） 原理、试验方法及注意事项的讲解（15 分钟） （2 ） 取小鼠脾脏和制备单细胞悬液（30 分钟） （3 ） 离心、灌注小室和封腊（30 分钟） （4 ） 观察和分析单、双扩结果（20 分钟） （5 ） 观察 PFC 结果和小结 10 分钟 3、吞噬细胞吞噬试验和免疫荧光染色实验 共 3 学时 （1） 原理、试验方法及注意事项的讲解（15 分钟） （2 ） 吞噬细胞吞噬实验 （共65 分钟） A ． 小鼠注射 SRBC （20 分钟） B ．小鼠腹腔取巨噬细胞和涂片（30 分钟） C ．观察结果（15 分钟） （3 ） 免疫荧光染色实验（共 120 分钟） A ． 取小鼠脾脏和制备单细胞悬液及稀释计数 （30 分钟） B ．荧光染色（40 分钟） C ．离心备涂片（20 分钟） D ． 荧光显微镜观察（30 分钟） （4 ） 小结 10 分钟 4 、淋巴细胞转化试验和 ELISA 检测 IgE 试验（一）共 2 学时 （1） 原理、试验方法及注意事项的讲解（15 分钟） （2 ） 取小鼠脾脏和制备单细胞悬液（30 分钟） （3 ）