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分子诊断技术与临床
2015-05-27
分子诊断技术与临床
孙成铭 刘日明
烟台毓璜顶医院检验科 2011 2012 2013 2014
2015.5.17
2015-05-27
分子诊断的概念 分子诊断技术检测目的
采用分子生物学方法(基因扩增、测序、杂交、蛋白
质组学和代谢组学分析等)检测患者体内特定遗传物
质的结构或表达水平的变化而做出的诊断。分子诊断
的材料包括DNA、RNA、蛋白质和小分子。
疾病诊断及分型 治疗及预后判断 风险预测
2015-05-27 2015-05-27
PCR技术介绍及临床应用
测序技术介绍及临床应用
PCR技术介绍及临床应用
芯片技术介绍及临床应用
质谱技术介绍及临床应用
1
2015-05-27
一、PCR技术介绍
常见的PCR方法:
PCR (Polymease chain reaction) 聚合酶链式反应 RT‐PCR
免疫PCR
用一对寡聚DNA作为引物,通过变性
巢式PCR
-退火-延伸这一周期多次循环,使
实时荧光PCR (临床最常用)
目的DNA得到扩增。
原位PCR
膜结合PCR
不对称PCR
这一扩增是以指数形式积累的,经
梯度PCR等30多种
6
25-30个循环后,扩增倍数可达10 。
实时荧光定量PCR 二、实时荧光定量PCR临床应用
1996年,美国Applied Biosystems公司首先推出实时荧光定
(一)在传染性疾病检测中的应用
量PCR技术。
实时荧光定量PCR 是指在PCR反应体系中加入荧光基团, (二)抗肿瘤药物相关基因检测
利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准
曲线对未知模板进行定量分析的方法。
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