植物组织培养脱毒.pdf

第九章 植物组织培养脱毒 一、植物病毒的危害和培养无病毒植物的意义 1、植物病毒的危害 病毒给植物生产带来的损失是很大的，如草莓病毒的 危害，使草莓产量严重降低，品质大大退化。葡萄扇叶病 毒使葡萄减产10%-18% 。花卉病毒的危害一般会影响花 卉的观赏价值，其表现是花少而小，产生畸形、变色等。 而且病毒危害与细菌、真菌不同，不能通过化学药剂 进行防治。 2、病毒的特性及其浸染 病毒是指在活体细胞内寄生增殖的不具细胞结构的生 命体。病毒在植物体内的主要传播途径有：  介体传播。如蚜虫、叶蝉、螨类等。  机械传播（汁液摩擦传播）。  无性繁殖材料和嫁接传播。  种子和花粉传播。 3、无病毒苗培育的意义 无病毒良种种苗的优点  产量提高  品质提高  抗病性增强 如草莓可增产20%—50%，植株结果多，单果重增加， 上等果比例提高。菊花切花品种的脱毒株，表现出株高增 加，切花数增多，花朵较大等特点。 “无病毒”概念 通常所说的无病毒应为“特定无病毒或特定 无病原菌”. 无病毒苗是一个相对概念,并不是绝对不带 有任何病毒,只是不带有对当地生产危害最 大的几种病毒而已. 二、脱除植物病毒的原理及方法 • 热处理脱毒法 • 微体嫁接离体培养脱毒法 • 微茎尖培养脱毒法 • 珠心组织培养脱毒法 组织培养脱毒法 • 愈伤组织培养脱毒法 1、热处理脱毒 植物细胞分裂和病毒繁殖之间存在着相互竞争。 在快速分裂的细胞中是正常核蛋白合成占优势， 而在细胞伸长期间是病毒核蛋白的合成占优势， 因此加速分生组织细胞的分裂，是能获得无病毒 植株的。 热处理可以钝化病毒的活性，使其增殖减缓或 停止，失去传染能力。但并不能杀死病毒。 热处理方法 愈伤组织热处理 热空气处理 热处理脱毒的局限性  并非所有病毒都对热处理敏感  延长热处理时间，病毒钝化效果好，同时也可能钝 化植物中的抗性因子而降低处理效果。  热处理后只有一小部分植株能够存活。 2 微体嫁接离体培养脱毒法  也称“试管嫁接”，是把极小（小于0.2mm ）的茎尖 作为接穗接到实生砧木上 （无菌种子培养获无菌 苗，种子实生苗不带毒），然后将嫁接后的砧木接 种到新的培养基上培养。  目前已在柑橘、苹果上获得成功。  剥离技术要求高。 3、微茎尖培养脱毒法 微茎尖培养脱毒，由于其脱毒效果好， 后代遗传稳定，是目前使用最广泛的一种 方法。其原理是： ① 病毒在植物体内分布不均匀，越接近顶端分生组 织，病毒浓度越稀。 ② 病毒DNA分子与细胞分裂蛋白质合成竞争，在迅 速合成的植物细胞中正常合成的蛋白质占优势。 茎尖培养脱毒原理 virus-free tissue virus particles found here Tobacco meristem 操作程序 外植体经表面灭菌后，在解剖镜下，经无菌操 作切取小茎尖，接种到备用培养基上，放入培养 室内进行培养，观察记录。 采用茎尖培养脱毒法，必须将植物种类、病毒 种类、剥离茎尖的大小以及培养基营养组成四个 方面统一起来考虑，才能收到理想的脱