第四章-第一讲-预处理、提取、细胞破碎.pdf

第四章 酶的分离纯化及产品成型 第四章 酶的分离纯化及产品成型 监（ 本章知识点： 4 测 ） （1）细胞的破碎、酶的提取 酶 重点 （2）酶的分离纯化：沉淀分离、离心 纯 分离、膜过滤、层析分离、电泳分离 化 过 （3 ）酶液的浓缩、结晶、干燥、成型 程 的 酶制剂生产全过程 培养基 灭菌 菌种 培养 过程控制和优化 培养液（发酵液） 成品 上游技术 下游技术 1) 培养液（发酵液）的预处理； 2) 初步纯化（提取）； 3) 高度纯化（精制）； 4) 成品加工。 第一节 概述 一、生物下游加工技术 下游加工过程包括目标产物的提取、浓缩、纯化及 成品化等过程。 大多数酶的回收纯化过程成本约占70% ； 医用酶的生产回收过程的成本高达85% ； 基因工程表达产物回收纯化过程成本一般占85-90% 以上； 青霉素回收过程成本约占50% ； 乙醇的回收过程成本仅占14%。 人干扰素是一种重要蛋白类生物药品，具有 抗癌和治疗肝炎等作用。 Yonehara等人： 醋酸锌盐析 离子交换层析 硫酸铵盐析 铜螯合层析 （83.0%） （62.7%） （96.2% ） （46.0% ） 疏水层析 凝胶电泳 共六步，总收率仅为16% （78.3%） （88.9%） Staehelin等人： 硫酸铵盐析 免疫亲和层析 阳离子交换层析 仅三步，总收率达81.0% 纯化方法选择的总体原则 1、判断采用的方法和条件是否得当，始终以检测 指标为参考标准; 纯化方法选择的总体原则 1、判断采用的方法和条件是否得当，始终以检测 指标为参考标准; 2、应对被纯化的酶的理化性质有一个比较全面的 了解; 酶分离纯化方法 分离依据的性质