组织培养的基本设备和无菌操作.pdf

第二章 植物组织培养的基本设备和无菌操作 本章主要内容  组织培养实验室的组成  组织培养的基本设备  组织培养所需的环境条件  组织培养的无菌操作 第一节 组织培养实验室的组成 基本 组织培养 辅助 实验室 实验室 实验室 基本实验室  洗涤室  配制室  灭菌室  无菌操作室  培养室  驯化移栽室 辅助实验室 用于细胞学、组织学观察。 组织培养室基本设置 洗涤室 化学实验室 培养基配制 灭菌室 观察室 缓冲室 温室 培养室 接种室 组培室分区布局 第二节 组织培养的基本设备 玻璃器皿 培养容器 培养容器 盛装容器 计量容器 器械用具 接种工具 仪器与设备 培养箱 培养箱 空调、加热器 高压灭菌锅 高压灭菌锅 冰箱、冰柜 振荡培养箱 摇床 电子天平 酸度计 显微镜 显微镜 水浴锅 纯水系统 超净工作台 超净工作台 试剂柜 培养基配制器具 培养基配制器具 培养架 温室 大棚 第三节 组织培养所需的环境条件 组织培养所需的环境条件 1、温度 2、光照 3、湿度 4、气体 5、培养基渗透压 6、培养基的pH值 1、温度 温度是植物组织培养成功的关键因素，温度最 重要的作用是决定呼吸速率和控制植物组织代谢 过程的化学反应。为保持一定的温度，培养室一 般要求较好的密闭条件，由空气调节器调节室温。 最适温度 温度处理 最适温度 一般植物生长的适宜温度在25±2℃之间。 例外：倒挂金钟22~24 ℃生长最好，温度升高生长放慢甚 至完全停止。 温度不仅对增殖，对器官的形成也有影响。可能与温度 调控内源细胞分裂素代谢系统有关。 例如：烟草芽的形成以18 ℃为最好，在12 ℃以下，33 ℃ 以上形成率很低。 温度处理的影响 在植物组织培养前，先对培养材料进行不同 温度处理，往往起到诱导和促进生长的作用。 例如： 胡萝卜切片进行4 ℃，16~32min的低温处理，比不 处理的生长大大加快。 天竺葵10℃低温处理茎芽分化优于20℃和30℃ 菊芋块茎组织的低温和高温处理均可促进生根。 2、光照 光照是组织培养中的重要条件。由于植物组培是在含 糖培养基上进行的，因此光照的主要作用是在形态建成 的诱导方面。它对细胞、组织、器官的生长及分化发生 作用。 光 周 期 光照强度 光 质 光周期  大多数植物对光周期是敏感的 最常用的光周期：16h光照＋8h黑暗 园艺上常用：12h光照＋12h黑暗 林木商品化组培：22h光照＋2h黑暗至24h光照  光周期对植物形态建成影响显著 例如： 天竺葵：15h～16h光照下，愈伤组织诱导芽形成最多 敏感型葡萄品种：其茎切段在短日照下形成根，长日照