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蛋白质的纯化与鉴定
Advanced Biochemistry Fall 2015
Protein Separation and
Purification
蛋白质分离和纯化-I
蛋白质分离纯化的必要性
需要单一的蛋白质研究其结构与功能
化学修饰需要单一的蛋白质
纯化改造过的蛋白质，从而开发出性
能更优良的蛋白质
Lecture Outline
蛋白质的分离纯化的基础
蛋白质的分离纯化原则和程序
蛋白质的含量测定
蛋白质纯度鉴定
蛋白质的分离纯化方法
蛋白质层析技术
蛋白层析的主要技术
10/12/2015 3
第一部分
蛋白质的分离纯化的基础：
结构和特性
蛋白质的结构和特性
1. 酸碱性质
2. 胶体性质
3. 分子量的测定
4. 结构和形状
一、蛋白质的酸碱性质
两性电解质
可解离基团：α-NH3+
α-COO-
侧链上的功能基团
氨基酸有的化学性质蛋白质就有
pI=正负电荷相等，净电荷为零时的pH
水化膜
+
－
+ + 酸 碱 －
－
－
+ +
碱 酸 － －
+ + －
－
带正电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 带负电荷的蛋白质
脱水作用 脱水作用 脱水作用
+ －
+ + －
+ 碱 酸 － －
+
－
+
－
+ + － －
带正电荷的蛋白质 不稳定的蛋白质颗粒 带负电荷的蛋白质
溶液中
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