动物检验检疫学实验指导.pdf

动植物检验检疫学 实验指导 主 编 陈力力 主 审 刘素纯 湖南农业大学食品科技学院微生物教研室 目 录 实验须知 ………………………………………………………………1 实验一 布氏杆菌的实验室诊断………………………………………2 实验二 炭疽的实验室诊断……………………………………………6 实验三 鸡新城疫的诊断及抗体水平检测……………………………8 实验四 真菌一般形态观察和临时玻片的制备…………………… 12 实验五 检疫性植物害虫的形态观察……………………………… 14 实验六 动物试验法………………………………………………… 16 实 验 须 知 动植物检疫检验学实验课的目的是训练学生了解动物检疫性重要疫病的病 源特性、临床症状与病理变化特征；掌握其诊断与检疫的基本操作技术。掌握重 要植物检疫性害虫的基本特征，掌握主要植物检疫性病源微生物的鉴定特征、生 物学特性以及在植物果实上的症状特点和基本检验方法；使学生巩固《动植物检 疫检验学》课程所学的理论知识。同时，通过实验，培养学生观察、思考、分析 问题、解决问题和提出问题的能力；树立严谨、细致、实事求是、一丝不苟的工 作作风。为上好动植物检疫检验学实验课，完成教学任务并保证安全，应注意如 下几点： 1．做好课前预习，明确实验的目的、原理、内容及操作中注意事项，以保 证实验的进度和效果。 2．正确进行实验操作，得出可靠的结果，写出详尽、规范、完整的实验报 告。 3 ．实验室中宜着工作衣帽，书包及其他物品存放在操作台下的柜中，禁止 饮食、吸烟及用嘴湿润铅笔和标签等物，以勿用手指或他物与面部接触。 4 ．沾有被检样的器皿及废弃物，应置于指定地点，先消毒后再洗涤；检查 过的样品经适当处理后废弃，以防病源传播。 5 ．实验中若发生意外，如吸入病料、划破皮肤、病料污染桌面、地面时， 应立即报告指导老师，及时处理，切勿隐瞒。 6 ．一切易燃品应远离火源。不可将酒精等倾斜向另一酒精等引火，以免发 生爆炸。如遇火险应先关灭火源，再用湿布或沙土掩盖灭火。电炉、电热板等用 完毕后应立即关灭。 7 ．使用实验仪器时要特别爱护，按操作规程工作、保养，避免不必要的损 耗和意外；使用消耗材料和药品等要力求节约，用毕归回原处。 8．实验室中各物均有一定位置，工作完毕后放回原处或指定地点，按要求 对实验室整理、清洁后方可离开，最后一人离开实验室前，应对门窗、自来水开 关、电源开关等检查一遍、关好、锁门。 实验一 布氏杆菌的实验室诊断实验 布氏菌病在世界各地均有发生，是一种人畜共患病，病原为布氏杆菌（革兰 氏阴性菌），这类细菌包含 6 种：牛 B 流产型，羊 B. melitensis (3 biovars), 猪B. suis (5 biovars), B. ovis, 狗B. canis, B. neotomae and B. maris. 牛是B流产型主要的宿主，绵羊和山羊是B. melitensis的主要宿主。原则上讲， 布氏杆菌不同亚型感染动物，都会造成繁殖障碍。例如，母畜的流产和不孕，公 畜的睾丸炎和附睾炎。 人类感染布氏杆菌的症状是波浪热，这对农民、实验室工作人员和屠宰工作 人员来说是相当危险的。特别是B. melitensis对人类有高度的致病性，是世界 上人畜共患病最严重的病原之一。被污染的山羊奶酪已经被频繁的报道说是感染 原。 动物在感染布氏杆菌7～15d可出现抗体，检测血清中的抗体是布氏杆菌病 诊断和检疫的主要手段。现在已经发展了一些快速的检测布氏杆菌的血清学方 法，其中乳汁环状反应、补体反应和ELISA’s是应用比较广泛的确认方法。所 有检测抗体都是针对滑型LPS O链的。无论使用那种血清学方法，都应该与注意 革兰氏阴性菌的交叉反应，如Fr