微生物学教程 周德庆 第3章╲t病毒和亚病毒.ppt

噬菌体M13或fd离开宿主细胞的方式 噬菌体Pfl从铜绿假单胞菌中分泌出来： 兰色柱：疏水a-螺旋，与病毒DNA结合，可穿越细胞膜。 红色柱：两性螺旋，存在于细胞膜上。 绿色线：病毒ssDNA 黄色钩：连接两柱的 短肽。 三、病毒的培养——活体培养 细菌细胞 鸡胚 昆虫细胞 其他动物细胞或组织 活的动物 四、病毒的纯化 超速离心， 沉淀（饱和硫酸铵），吸附，电泳。 尿囊绒膜 尿囊腔 清蛋白 羊膜腔 五、病毒的计数 扫描电镜 病斑计数 血清学方法 生物化学方法 六、病毒的分类 宿主范围 核酸类型 对称体制，有无囊膜 第2节 原核生物的病毒——噬菌体 一、噬菌体（phage）概述 1. 噬菌体的基本形态 球形，丝形， 复合形（蝌蚪状） 噬菌体的核酸类型 ssRNA, dsRNA, ssDNA, dsDNA 噬菌体的繁殖 5个阶段——吸附，侵入，增殖，成熟，释放。 烈性噬菌体（virulent phage）（教材P69）：凡 在短时间内能完成以上5个阶段而实现其繁殖的噬 菌体，称为烈性噬菌体。 裂解性周期（lytic cycle）：烈性噬菌体的繁殖 过程。又称为增殖性周期（productive cycle）。 4. 溶源性（lysogeny） 溶源性：温和噬菌体侵入宿主细胞后，不引起宿主细胞裂解，而是将噬菌体基因组整合到宿主基因组上，并随宿主基因组的复制而同步复制的现象。 温和噬菌体（temperate phage）：凡能引起溶源性的噬菌体即称为温和噬菌体，它有3种存在形式：（1）游离态（2）整合态（前噬菌体prophage）（3）营养态 溶源菌（lysogen, lysogenic bacteria）（教材P73）：是一类能与温和噬菌体长期共存，一般不会出现有害影响的宿主细菌。 5. 噬菌体效价的测定 （噬菌体）效价（titre）：每毫升试样中所含有 的具侵染性的噬菌体粒子数，又称为噬菌斑形成单 位数（pfu）或感染中心数。 测定效价的方法：双层平板法（two layer plating method）。 噬菌斑的培养方法—— 双层平板法 6. 噬菌体的一步生长曲线 二、噬菌体举例（T4，λ） 1. T4 噬菌体 T 噬菌体是一群dsDNA，感染E.coli和相关的细 菌。是研究得最早、最详细的病毒，它们被命名为 T1——T7。 T4 噬菌体是最大的、复制机制最复杂的T 噬菌体。 （1）基因组1.7×105 bp，dsDNA， 编码135种蛋白质，几种tRNA. 具有3000-6000bp的末端重复序列。 （2）糖基化的5-羟甲基胞嘧啶 T4吸附到E. coli细胞上，将DNA注入细胞，核衣壳留在外面。 T4噬菌体核酸的复制 T4噬菌体 核酸的复制 λ 噬菌体 是研究得最透彻的一种溶源性噬菌体。 感染 E.coli。 正20面体头部直径64 nm 尾 150 nm 单一尾丝 23 nm 线性ds DNA，具12 核苷酸的粘性末端， 形成环状的DNA 有48502bp。 * 第3章 病毒和亚病毒 真病毒：核酸，蛋白质 非细胞生物 类病毒：独立侵染性RNA 亚病毒 拟病毒：非独立侵染性RNA 朊病毒：单一的蛋白质 第1节 病毒概论 病毒是由核酸和蛋白质等少数几种成分组成 的超显微“非细胞生物”，其本质是一种只含DNA或 RNA的遗传因子，能以感染态和非感染态两种状态 存在。 * 病毒的发现和名称由来 1892年，俄国一植物学家研究烟草花叶病。 1896年，荷兰学者Martinus Beijerinck证明病毒的存在，并 命名这类有传染性的活体为Virus(毒素，毒液）。 * 病毒的起源 假说1：病毒是最早出现的生物。核酸不断复杂化直至成为