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液相色谱基本常识 提纲 回顾上节课 高效液相色谱(HPLC）介绍 HPLC色谱柱 HPLC色谱方法的开发案例 使用注意事项 HPLC色谱检测器介绍 2 色谱法基本原理 3 色谱法基本原理 色谱法的原理 利用混合物中各组份在不同的两相中溶解,分配,吸附等化学作用 性能的差异,当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复多次受 到上述各作用力而达到相互分离 两相中有一相是固定的,叫作固定相(Stationary Phase),也就是咱 们的色谱材料；有一相是流动的,称为流动相(Mobile Phase),流 动相又叫洗脱剂,溶剂 正相色谱： 反相色谱： 色谱定性： 色谱定量： 色谱的类型 按流动相的物态分: 气相色谱 (Gas Chromatography, GC)-用气体作为流动相(又叫 载气) 液相色谱 (Liquid Chromatography, LC)-用液体作为流动相(又叫 洗脱剂) 按固定相的形态分: 平面色谱 纸色谱 薄层色谱 柱色谱 高效液相色谱定义 6 什么是HPLC? 高效液相色谱法 HPLC(High Performance Liquid Chromatography ) 是一种区别于经典液相色谱,基于仪器方法的高效能分 离手段: 高性能色谱柱，高精度输液泵，高灵敏度检测器… 广泛应用于各个领域: 医药，环保，石化，生命科学，食品工业，农业… 无论在技术上，理论上，还是在应用上仍有较大的发展 空间 HPLC分离流程 色谱柱 (固定相) 数据系统 溶剂 进样器 (流动相) 泵 检测器 废液 高效液相色谱法的特点 优点：高效(60000理论塔板/米) 、高速 (1~10mL/min) 、高灵敏度（微升数量级），高压 (150~300kg/cm2) 、高精度、高自动化 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分 析方法。 缺点：仪器设备价格昂贵 高效液相色谱柱和色谱分离材料 色谱的“心脏” 高效液相色谱柱和色谱分离材料 a 流动相 样品 ABCDE A B 分离材料 A C D E 液相色谱柱和色谱填料（实物） 液相色谱柱和色谱填料（实物） Key Lab of Separation Science for Analytical Chemistry, DICP, CAS 硅胶基质电镜照片