RNA合成加工.pdf

第24 章 RNA 的生物合成和加工 RNA 合成需要模板 两种模板：DNA和RNA ，前者为转 录或DNA 指导下的RNA 合成；后者 为复制或RNA 指导下的RNA 合成 讲解内容：DNA 指导下的RNA 合成 RNA 指导下的RNA 复制 一. DNA指导下RNA合成 ㈠. 概述 合成前体或原料:四种核糖核苷三磷酸 合成模板:DNA链中一条,模板链, 负链,无义链, 非编 码链; 另一条链称为非模板链, 正链,有义 链,编码链 合成单位:转录单位, 包括起 始、延伸和终止 合成方向: 5’→3’,无需引物 合成催化酶:DNA指导下 的RNA 聚合酶 ㈡. DNA指导下的RNA 聚合酶 1. 聚合酶通性 以适当的DNA 为模板,全保留方式 底物为四种核苷三磷酸 合成方向5’→3’ 无需引物 Mg2 ＋促进聚合反应 ⒉ 大肠杆菌DNA 指导下的 RNA 聚合酶 全酶由α ββ’σ五种亚基组成46 －48 万 2 α ββ’核心酶：已开始合成RNA链延长，不具 2 有起始合成 σ 使RNA 聚合酶稳定地结合到DNA 的启动子 上，转录的起始密切相关 全酶制剂中含ω亚基, 功能未知 ⒊真核生物DNA 指导下的RNA 聚合酶 • 真核生物RNA 聚合酶通常有8-14个亚基, 并含有Zn2+ 离子.利用抑制剂α- 鹅膏蕈碱 可将其分为三大类 酵母RNA 聚合酶II进行凝胶电泳时至少有10条明显 的条带,最大的三个亚基相当于大肠杆菌β,β’和α亚 基,无σ 因子的类似物, 转录的起始需要转录因子. ㈢. 启动子和转录因子 启动子:RNA聚合酶识别,结合和开始转录的一段 DNA 序列 转录因子:RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子(蛋 白质)称为转录因子,其作用或是识别DNA 的特殊 序列,或是识别其他因子,或是识别RNA 聚合酶 RNA聚合酶结合的 原核生物 共有序列 启动子 转录起始位点 结构基因 DNA模板链 RNA聚合酶 ⒈原核生物启动子的一般结构 DNA局部双 链的解开 RNA 聚合酶 识别信号 σ 因子能直接和启动子的-35 序列以及-10序列相 互作用,二者之间的间距大小直接影响σ 因子的作 用力,不同启动子σ 因子可能不同 ⒉复杂的真核生物启动子 真核生物启动子通常由一些短的保守序列 所组成,被各种适当的转录因子识别, 多种转 录因子和RNA 聚合酶在起点上形成前起始 复合物促进转录. 真核生物启动子三类, 分别与三种RNA 聚合 酶的转录相关.RNA 聚合酶I和RNA 聚合酶 III 的启动子结构种类有限, 而RNA 聚合酶II 启动子结构多种多样. for his studies of the molecular basis of eukaryotic transcription ㈣. 终止子和终止因子 终止子:提供转录停止信号的DNA 序列 终止因子:协助RNA 聚合酶识别终止信号的 辅助因子(蛋白质),Nus 因子 通读:终止子的作用被特异的因子所阻止, 使 聚合酶得以越过终止子继续转录 抗终止因子:引起抗终止子作用的蛋白质称 ⒈大肠杆菌两类终止子 • 转录中终止信号位于已转录的序列中,原核生物 的终止子在终