《诊断学》 第五节 自身抗体检测.pdf

第五节 自身抗体检测 当某些原因削弱或破坏机体的自身免疫耐受 （autoimmune tolerance ）时，该机体的免疫系统就会对自身 组织或成分产生免疫应答，这种机体免疫系统对自身组织或 成分产生的免疫应答称为自身免疫 （autoimmunity ）反应。由 于自身免疫反应而产生的疾病称为自身免疫性疾病 （autoimmune disease，AID ）。按自身抗原分布的范围可分为 器官特异性和非器官特异性。诊断自身免疫病的重要方法是 作自身抗体的检测。 一、类风湿因子的检测 类风湿因子 （rheumatoid factor，RF）是变性IgG 刺激机 体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿关节炎患者的血 清和关节液内。主要为IgM 型，也有IgG、IgA、IgD 和IgE 型。 用乳胶凝集法测出的主要是IgM 型；速率法敏感但不能分型。 【检测方法】 乳胶凝集法、浊度分析法、ELISA 法。 【临床意义】 类风湿性疾病时，RF 的阳性率可高达70 ％～90 ％，类风 湿关节炎的阳性率为70 ％。IgG 型与患者的滑膜炎、血管炎和 关节外症状有关，IgM 型与IgA 型的效价与病情有关，与骨质 破坏有关。其他自身免疫性疾病，如多发性肌炎、硬皮病、 干燥综合征、SLE 、自身免疫性溶血、慢性活动性肝炎等也见 1 RF 阳性。某些感染性疾病，如传染性单核细胞增多症、结核 病、感染性心内膜炎等也多呈现阳性反应。故本试验的特异 性不高，应予鉴别诊断。 二、抗核抗体检测 （一）抗核抗体测定 广义的抗核抗体 （antinuclear antibody，ANA ）的靶抗原 不再局限于细胞核内，而是扩展到整个细胞成分，包括细胞 核和细胞浆。经典的ANA 是指针对真核细胞核成分的自身抗 体的总称。ANA 的类型主要是IgG，也有IgM、IgA。这种抗体 无器官和种族的特异性。检测方法为间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence IIF ）。以Hep-2 细胞和鼠肝作抗原，固定 于载玻片上，与受检者血清反应。血清中抗体与抗原结合， 再加入FITC 标记的抗人Ig，在荧光显微镜下可观察到ANA 的 荧光强度和荧光模型。抗核抗体的荧光模型主要包括核均质 型：与抗 ds-DNA、抗组蛋白和核小体抗体有关；核膜型：主 要有抗核孔复合物和抗板层素两种抗体；颗粒型：与抗U1 一 RNP、抗Sm、抗SS-A 、抗SS-B 等抗体有关；核点型：少核点 型即p80 盘曲蛋白抗体；多核点型即Spl00 抗体；着丝点型： 与抗着丝点抗体有关；核仁型：与针对核糖体、U3 一 RNP、 RNA 聚合酶的抗体、抗 Scl-70 抗体、PM-Scl 抗体、抗原纤维 蛋白抗体有关。细胞周期相关蛋白与增殖细胞核抗原有关； 胞质抗体：与抗线粒体抗体、抗高尔基体抗体、抗溶酶体抗 2 体、抗肌动蛋白抗体、抗Jo-1 抗体等有关。 （二）可提取性核抗原抗体谱测定 可提取的核抗原 （extractable nuclear antigens ENA ）由多 种相对分子质量不同的多肽构成，即双链DNA、Sm、核糖体、 Scl 一70（Sclerosis 一70 ）、Jo-1、SS-B（Siogren-B）、SS-A（Siogren-A ） 和RNP 等。利用免疫印迹试验可以对这些抗原的自身（抗ENA） 抗体进行检测，用来反映某些自身免疫病的状况。 不同的抗核抗体对应的 Hep 一 2 细胞的荧光核型特点及 临床意义见表4-8-2 。不同的抗核抗体荧光核型图片见图4-8-1 至图4-8-7 。 3 4 5