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基因克隆及常见问题分析
TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO.,LTD.
内容概要
DNA克隆技术简介
DNA克隆实验流程
DNA克隆的要素
DNA克隆常见问题与应对策略
800免费电话:800-990-6057
DNA 克隆的目的
目的基因的序列测定及筛选
增加目的基因的拷贝,降低后续实验的难度
研究基因表达
其他(如点突变、SNP等)
800免费电话:800-990-6057
克隆方法(以PCR产物克隆为例)
TA克隆—蓝白斑筛选
非定向连接克隆,连接效率高,操作简单,易于长期保存。
可进行测序后对正确克隆扩大培养。
800免费电话:800-990-6057
克隆方法(以PCR产物克隆为例)
零背景克隆—无需蓝白斑筛选
800免费电话:800-990-6057
克隆方法(以PCR产物克隆为例)
酶切连接克隆
800免费电话:800-990-6057
内容概要
DNA克隆技术简介
DNA克隆实验流程
DNA克隆的要素
DNA克隆常见问题与应对策略
800免费电话:800-990-6057
克隆实验的流程
网上检索
引物设计
扩增产物 与克隆载体
PCR扩增
纯化 连接
转化、
DNA制备 培养
感受态
E.coli制备
生物信息学 PCR或 重组克隆
测序检测 质粒提取
分析等 酶切鉴定 筛选
800免费电话:800-990-6057
TIANGEN六种PCR耐热聚合酶
高扩增效率 高扩增、高保真
高保真 Pfu Long 长片段扩增
Taq
高扩增、高保真、 高特异性
高特异性
800免费电话:800-990-6057
不同DNA聚合酶PCR产物对比
DNA聚合酶 扩增片段末端 适合克隆类型 克隆前处理
Taq 零背景克隆 平端化(平端化酶)
粘末端
HotMaster Taq TA克隆 无
零背景克隆 无
Pfu 平末端
TA克隆 加A (加尾酶)
Taq P
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