层析及电泳复习要点(2012.3,2010级生科).pdf

泳技术 泳技术 Electrophoresis Technology Electrophoresis Technology 生物化学与分子生物学教研室 生物化学与分子生物学教研室 1 P42 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 Major Object 【授课对象】 2010级生物科学本科 【教学时数】 5学时 】 【掌握】电泳技术的基本概念和基本原理。 渗的概 念。纸 泳、醋酸纤维薄膜 泳、琼脂糖凝胶 泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫 泳技术、毛细 管电泳的基本原理。毛细管 泳的优点。聚丙烯 酰胺凝胶盘状 泳、连续密度梯度 泳、SDS- PAGE 泳、等 聚焦电泳、双向凝胶 泳的基 本原理。蛋白质印迹法的基本原理。 【熟悉】影晌电泳分离的主要因素。电泳的分类。 了解】电泳中蛋白质的检测、鉴定与回收。 2 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 电泳的基本原理 电泳（electrophoresis ）技术: 是指在电场作用下， 颗粒由于所 荷 不同及分子大小差异而有不同迁移行为，从而彼 此分离开来的一种实验技术。 由于混合样品中各组分 性质、 量、 相对分子质量的不同，在同一 场作用下，泳动 的方向和速率各异，从而达到分离鉴定的目的。 3 P42 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 一、影响电泳分离的主要因素 1. 待分离生物大分子的性质 待分离生物大分子所 的 荷、分子 大小和性质都会对电泳有明显影响。一般 来说， 荷量越大、直径越小、形状越接 近球形，则其电泳迁移速度越快。 4 P44 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 2. 缓冲液的性质 ⑴对于蛋白质等两性分子，缓冲液pH会影响 其 性质，pH pI ，Pr ，向正极泳动 ；反之亦反。 ⑵缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的 解离程度。溶液pH 距其pI 愈远，所带净 荷量越多， υ越大。 P 44 5 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试