生物分离工程 第七章.pdf

7 液 相 色谱 7 液相 色谱 7.1 色谱原理与分类 7.2 分离度 7.3 凝胶过滤色谱 7.4 离子交换色谱 7.5 疏水性相互作用色谱 7.6 反相色谱 7.7 流通色谱 7 液 相 色谱 7.1 色谱原理与分类 7.1.1 原 理 利用溶液中不同的溶质组分与固定相之间相互作用 的不同，使得不同的溶质组分随流动相通过固定相时的 移动速度不同，从而使不同的溶质组分得以相互分离的 分离技术。 固定相：固定不动的相。可以是固体，也可以是液 体。 流动相：可以流动的相。可以是液体、气体和超临 界流体。 7 液 相 色谱 洗脱曲线 柱色谱设备和操作示意图 7 液 相 色谱 7.1.2 分 类 1. 流动相的相态分类 气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱 2. 固定相的形状（式）分类 柱色谱、纸色谱、薄层色谱 3. 操作压力分类 低压液相色谱（ 0.5 MPa ） 液相 中压液相色谱（0.5 ~ 4.0 MPa ） 柱色谱 高压液相色谱（4.0 ~ 40 MPa ） 7 液 相 色谱 4. 流动相的流动方向分类 液相柱色谱：轴向流色谱、径向流色谱 5. 分离的操作方式分类 液相柱色谱：洗脱展开、置换展开、迎头分析 6. 溶质组分与固定相相互作用机理分类 吸附色谱、分配色谱、凝胶色谱、离子交换色谱、疏 水色谱、反相色谱、亲和色谱等 7 液 相 色谱 7.2 分 离 度 色谱分离中，相邻两个溶质之间相互分离的程度， 称为分离度，又称分辨率。 θR2 2(θ θ ) R R2 R1 S W  W 1 2 θR1 实际分离中，一般R 值在 S 1~1.5之间即可认为溶质间实 现了良好的分离。 W1 W2 7 液 相 色谱 7.3 凝胶过滤色谱 7.3.1 原理与操作 以各种颗粒状的多孔凝胶作为固定相，利用料液中 溶质分子量的差异进行分离的液相色谱分离法，称为凝胶 过滤色谱。又称凝胶渗透色谱、分子筛色谱、分子（尺寸） 排阻色谱。 凝胶颗粒 7 液