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生物分离工程 第八章

8 亲 和 色谱 8 亲和 色谱 8.1 生物亲和作用 8.2 亲和色谱原理 8.3 亲和色谱介质 8.4 亲和膜色谱 8.5 其他亲和分离技术 8 亲 和 色谱 生物物质,具有识别特定物质并与该物质相结合的 能力。生物分子之间的这种特异性相互作用称为生物亲 和作用或简称亲和作用。 利用生物分子间的这种特异性亲和作用的原理进行 生物物质分离纯化的技术称为亲和分离或亲和纯化。 亲和分离中最典型的代表是亲和色谱。将生物亲和 作用的特异性与其他分离技术如膜分离、双水相萃取、 反胶团萃取、沉淀分离和电泳等相结合,相继出现了亲 和过滤、亲和分配、亲和反胶团萃取、亲和沉淀和亲和 电泳等其他亲和分离技术。 8 亲 和 色谱 8.1 生物亲和作用 8.1.1 亲和作用的本质 亲和作用特异性本质:是由生物分子特定的空间结 构所决定的,如同“钥匙”和“锁孔”的关系。 静电作用 氢键作用 亲和作用 疏水性相互作用 力的本质 配位键作用 弱共价键作用 8 亲 和 色谱 8.1.2 影响亲和作用的因素 (1 ) 离子强度 (2 )pH值 (3)抑制氢键形成的物质 (4 )温度 (5 ) 离液离子 (6 )螯合剂 8 亲 和 色谱 8.1.3 亲和作用体系 亲和作用分子对 特 异 性 A B 高特异性 抗原 单克隆抗体 荷尔蒙 受体蛋白 核酸 互补碱基段、核酸结合蛋白 酶 底物、产物、抑制剂 群特异性 免疫球蛋白 A蛋白、G蛋白 酶 辅酶 凝集素 糖、糖蛋白、细胞、细胞表面受体 酶、蛋白质 肝素 酶、蛋白质 活性染料(色素) 酶、蛋白质 过度金属离子 酶、蛋白质 氨基酸(组氨酸) 8 亲 和 色谱 亲和作用是两种生物分子(分子对)之间所具有的 特异性相互作用力,可以将其中的任一一种分子同固相 载体结合,用来吸附另外一种分子,从而使另外一种分 子同其它杂质相互分离。一般将具有生物亲和作用的分 子对中同固相载体结合的分子称为配基。结合有亲和配 基的固体粒子称为亲和吸附剂。 8 亲 和 色谱 8.2 亲和色谱原理 以偶联有亲和配基的亲和吸附剂作为固定相,利 用混合溶液中

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