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第四章 水中的细菌学测定 水是微生物广泛分布的天然环境，当水体受到污染时，水 中微生物的数量可大量增加。 通过检查水中细菌总数，特别是检查作为粪便污染的指示 菌，可间接判断水体污染状况和环境卫生质量。 重点：掌握水中细菌总数的测定、水中总大肠菌群的测定 以及水中粪大肠菌群的测定方法。 第四章 水中的细菌学测定 一、水样的采集 1、采水容器 （1）采样瓶：通常采用以耐用玻璃制成的，具磨口玻璃塞的500mL 广口瓶。 （2）采样瓶的洗涤：一般可用加入洗涤剂的热水洗刷采样瓶，用清 水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗1-2次。 （3 ）采样瓶的灭菌：将洗涤干净的采样瓶盖好瓶塞，用牛皮纸等防 潮纸将瓶塞、瓶顶和瓶颈处包好，置干燥箱160-170℃干热灭菌2小时， 或用高压蒸汽灭菌器121℃灭菌15min。 灭菌后的采样瓶，两周内未使用，需重新灭菌。 第四章 水中的细菌学测定 一、水样的采集 2 、采样步骤及注意事项 （1）去氯和高浓度重金属 采集加氯处理的水样时，余氯的存在会影响待测水样在采集 时所指示的真正细菌含量，因此需经过去氯处理。可在洗涤干净 的样品瓶内，于灭菌前按500mL采样瓶加入0.3mL10%Na S O 2 2 3 溶液，然后盖好瓶盖，用如上所述的灭菌方法进行灭菌。 当被测水样含有高浓度重金属时，则需在采样瓶内，于灭菌 前加入螯合剂以减少金属毒性，采样点位置较远、需长距离运输 的水样如此处理更为重要。可按500mL采样瓶加入1mL15%的乙 二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2 ）溶液。 第四章 水中的细菌学测定 一、水样的采集 2 、采样步骤及注意事项 （2）已灭菌和封包好的采样瓶，无论在什么条件下采样时，均要小心 开启包装纸和瓶盖，避免瓶盖及瓶子颈部受杂菌污染，并注意在使 用船只或附带的采样缆绳等附加设备采样时可能造成的污染。 （3）采集江、河、湖、库等地表水样时，可握住瓶子下部直接将已灭 菌的带塞采样瓶插入水中，约距水面10～15cm处，拔玻璃塞，瓶口 朝水流方向，使水样灌入瓶内然后盖好瓶塞，将采样瓶从水中取出。 如果没有水流，可握住瓶子水平前推，直到充满水样为止。采好水 样后，迅速盖好瓶盖和包装纸。 （4 ）采集一定深度的水样时，可使用单层采水瓶 （图4 －1）或深层采 水瓶 （图4 －2）。 第四章 水中的细菌学测定 一、水样的采集 第四章 水中的细菌学测定 一、水样的采集 2 、采样步骤及注意事项 （5）从自来水龙头采集样品时，不要选用漏水的龙头，采水前可 先将水龙头打开至最大，放水3～5min，然后将水龙头关闭，用 酒精灯火焰灼烧约3min灭菌，或用70％的酒精溶液消毒水龙头 及采样瓶口，再打开龙头，开足，放水1min。以充分除去水管中 的滞留杂质。采水时控制水流速度，将水小心接入瓶内。 （6）采样时不需用水样冲洗采样瓶。采样后在瓶内要留足够的空 间，一般采样量为采样瓶容量的80%左右，以便在实验室检查时， 能充分振摇混合样品，获得具有代表性的样品。 第四章 水中的细菌学测定 一、水样的采集 2 、采样步骤及注意事项 （7）在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不 同层次的搅扰；同一采样点与理化监测项目同时采样时，应先 采集细菌学检验样品。 （8）在危险地点或恶劣气候条件下采样时，必须有防护措施，保 证采样安全，并做好记录，以便对检验结果正确解释。 （9）采样完毕，应将采样瓶编号，做好采样记录。将采样日期、 采样地点、采水深度、采样方法、样品编号、采样人及水温、 气温情况等登记在记录卡上。 第四章水中的细菌学测定 二、样品保存 1）各种水样，特别是地表水、污水和废水的水样，易受物理、 化学或生物的作用，从采水至检验的时间间隔内会