蛋白质分离纯化实验疑难问题与解答.pdf

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蛋白质分离纯化实验疑难问题与解答

蛋白质分离纯化实验 疑难问题与解答 预 原材料 破碎 处 溶解 理 离心 提取液 粗 盐析 超滤 分 有机溶剂沉淀 离 透析 粗提液 凝胶色谱 精 离子交换色谱 分 亲和色谱 离 精提液 高效液相色谱 电泳 问题1 :超声破碎后酶活降低 超声功率 控制不当 超声效果 处理时间 温度过高,酶活降低 影响因素 超声间歇 问题1 :超声破碎后酶活降低 冰 浴 降低温度 处理方法 预实验 确定目的蛋白最佳超声条件 问题2 :提取过程中蛋白质易降解 温度过高 蛋白酶作用 问题2 :提取过程中蛋白质易降解 处理方法 低温提取 选择合适超声条件 加入蛋白酶抑制剂 缩短提取时间 低温保存:4℃短暂保存、-80℃长期保存 预 原材料 破碎 处 溶解 理 离心 提取液 粗 盐析 超滤 分 有机溶剂沉淀 离 透析 粗提液 凝胶色谱 精

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