土壤中蛔虫卵的检查及活力测定法专用课件.ppt

人活蛔虫卵形态 死蛔虫卵形态 死蛔虫卵形态 死蛔虫卵形态 （一）原理 美蓝、伊红、硼砂染液（简称M.E.B）溶于水呈碱性。 活虫卵可以还原碱性染料，降低着色力，不易被染色。 死虫卵不能还原碱性染料，容易着色。 蛔虫卵外层蛋白膜容易被着色，染色前需脱去蛋白膜。 2、染色镜检 吸取虫卵沉淀物一滴置于载玻片上，加M.E.B染色液一滴，上覆盖玻片，静置3～5分钟后镜检。 或者，吸取虫卵沉淀物1滴放入小试管内，加入染色液染30分钟，再用蒸馏水洗2～3次，吸取沉淀物镜检。 3、注意： M.E.B的PH值应在10左右，不宜太高； 脱蛋白膜后，应洗净次氯酸钠，否则影响碱性染料的着色效果。 * * 土壤中蛔虫卵检查及活力测定方法 谢 红 检验土壤蛔虫卵的原理，是先用碱性溶液和已经处理过的土壤样品充分混合，分离蛔虫卵，继用比重较蛔虫卵比重大的溶液为漂浮液，使蛔虫卵漂浮在溶液的表面，从而收集检验之；或加入清水，因蛔虫卵的比重大于水的比重，使蛔虫卵沉在水底，从中吸取蛔虫卵检验之。所用方法为改良饱和硝酸钠漂浮监察法。 改良饱和硝酸钠漂浮法 (1)取回土样，剔除菜叶、树皮等大杂物，压碎土样中的大颗粒； (2)过筛 先后用孔径3mm的铜筛和孔径为2mm的铜筛过筛，收集过筛后的土样； (3)取2支50毫升大离心管，各放入过筛后的土样10g，加5%氢氧化钠溶液至40或45ml刻度线； 改良饱和硝酸钠漂浮法 (4)充分混合，离心，每分钟2,000转，离4分钟； (5)倾去上部的氢氧化钠（即弃去上部碱性溶液）； (6)加入饱和硝酸钠溶液搅拌混匀，每分钟2000转，离心4分钟； (7)离心后，再加饱和硝酸钠溶液满至管口，覆上18mm×18mm盖玻片； (8)静置15min后，取下盖玻片置于载玻片上镜检。 受精猪蛔虫卵 大小：50～87×40～60μm 形状：椭圆形或圆形，卵壳厚，外包有粗糙凹凸不平的蛋白膜，内含尚未分裂呈颗粒的卵细胞。 人蛔虫卵 大小：45～75×35～50μm (平均60μm） 形状：短椭圆形或近圆形，卵壳厚，呈双线层，其外包有一层厚而呈乳头状突起的蛋白膜 土壤中的动物蛔虫卵与人蛔虫卵 牛羊蛔虫卵 大小：69～95×60～77μm 形状：近球形，外有似蜂窝状蛋白膜。 人蛔虫卵 犬弓蛔虫卵 大小：75×90μm 形状：近球形，也常有呈卵形，有粗糙凹凸不平卵壳，卵壳内充满黑褐色到黑色的尚未分裂，呈颗粒状内含物。 人蛔虫卵 猫弓蛔虫卵 大小：65×75μm 形状：同犬弓蛔虫卵。 人蛔虫卵 蛔虫卵活力测定方法 含一个卵细胞活受精蛔虫卵，外包有乳头状突起的蛋白膜 脱蛋白膜活受精蛔虫卵 外包蛋白膜的死受精蛔虫卵，卵细胞移向一端 脱蛋白膜的死受精蛔虫卵， 卵细胞移向一端 一、直接镜检法（死活蛔虫卵的形态比较） 空泡化死受精蛔虫卵 外包蛋白膜死受精蛔虫卵，卵内 脂肪变性，细胞质形成空泡 含幼虫的活受精蛔虫卵 卵壳内幼虫变形的死受精蛔虫卵 含一个卵细胞活受精蛔虫卵，外包有乳头状突起的蛋白膜 脱蛋白膜活受精蛔虫卵 含2个卵细胞活受精蛔虫卵 含16个卵细胞活受精蛔虫卵 未受精蛔虫卵外包锯齿状突起的蛋白膜 脱蛋白膜的未受精蛔虫卵 含幼虫的活受精蛔虫卵 外包蛋白膜的死受精蛔虫卵，卵细胞移向一端 脱蛋白膜的死受精蛔虫卵，卵细胞移向一端 桑椹期脱蛋白膜死蛔虫卵 死受精蛔虫卵，在卵细胞上部可见透明细胞质 外包蛋白膜死受精蛔虫卵，卵内脂肪变性，细胞质形成空泡 脱蛋白膜死受精蛔虫卵，在卵细胞上部形成空泡 卵细胞皱缩死受精蛔虫卵 空泡化死受精蛔虫卵 卵细胞崩解的死受精蛔虫卵 卵细胞崩解的死受精蛔虫卵 卵细胞不规则裂开的死受精蛔虫卵 卵胚变形的死受精蛔虫卵 内含物变形死受精蛔虫卵 卵壳内幼虫变形的死受精蛔虫卵 二、染色法鉴别蛔虫卵死活 （二）步骤 1、脱蛋白膜 将收集的蛔虫卵加入30%次氯酸钠，作用数分钟，并经常振荡，再用蒸馏水洗2次，即可脱掉蛋白膜。