利用GCMRM检测去势大鼠前列腺中睾酮、双氢睾酮和脱氢表雄酮.pdfVIP

V01．29 高等学校化学学报 No．1l 2008年11月 CHEMICALJOURNAl，OFCHINESEUNIVERSmES 2155～2158 利用GC／MRM检测去势大鼠前列腺中 睾酮、双氢睾酮和脱氢表雄酮 陈 君1，梁琼麟1，李珲2，罗国安1，王义明1 (1．清华大学化学系，北京100084； 2．北京大学泌尿外科研究所，北京大学第一医院，北京100034) 摘要建立了一种分析睾酮、双氢睾酮及脱氢表雄酮的GC／MRM方法．该方法回收率高，灵敏度好，对样 品需求小，已运用于研究去势大鼠前列腺中各种雄激素含鼍的变化．以去势犬鼠为模型，对去势后3个月内 其前列腺内雄激素含量的变化进行检测分析．去势后，大鼠前列腺中雄激素含餐经过2个月的平台后，至术 后3个月出现明显降低．而抑制5a还原酶药物的作用，术后2个月时能明显改变前列腺中激素含量水平． 关键词前列腺；雄激素；气相色谱一质谱联用 中图分类号0657 文献标识码A 文章编号0251-0790(2008)11-2155-04 前列腺癌目前在欧美的发病率仅次于肺癌和结肠癌，是男性健康中的莺要议题…．不论是正常的 前列腺组织还足恶性的前列腺肿瘤的生长，都依赖于机体中具有生理活性的雄性激素浓度心]．基于此 于前列腺癌的治疗手段就是抑制机体中的雄性激素的分泌．抑制雄性激素分泌的方法主要 有两种：第一种是利用外科手术阉割睾丸，第二种是利用雄性激素拮抗剂治疗．去除雄性激素的治疗 对于早期前列腺癌有效率达到80％一90％．但足经过一段时间，前列腺癌细胞变成能够抵抗雄性激素 拈抗剂，此时的生长期转化为“非雄性激素依赖期”．前列腺中的雄性激素主要米源于睾丸和肾上腺 (图1)．去势手术后，肾一J：腺究竟如何影响前列腺l|I激素的代谢，目前并无定论．雄性激素主要是睾酮 和双氢睾酮，在生物体内睾丸和肾上腺主要通过胆固醇的侧链氧化、双键异构、羰基还原等步骤合成． 、 o、．9、r ．一fr、 刖 。r^忡H H“∥ 一H。哎∥一H。础广一 Cholesterol 1 Pregnenolone 7a．H、tdroxyprogesterone Anabolismof Fig．1 pathwayandrogens GC／MS方法因其高灵敏度已被用于甾体激素的检测．由于生物样品中甾体激素含量较低，利用传 统GC／MS方法则对样品前处理提出了较高的要求．而生物样品中的脂类物质对甾体激素的检测会造 成较严重的干扰．正己烷或环己烷通常用来通过液一液萃取技术从脂类物质中分离出甾体激素13,4J．这 种方法耗时长，溶剂消耗大，而且回收率不高。5’引．而固相萃取方法能有效地提高甾体激素的回收 率一J．另外，二级质谱的运用能有效地消除脂类物质对甾体激素检测的干扰口j． 本文建寺了一种适用于组织样品中甾体激素分析的同相萃取方法，并发展了一种基于二级质谱技 术的GC／MRM方法，同时将其应用于大鼠前列腺样晶中睾酮和舣氢睾酮含量的测定．通过给大鼠进行 双侧睾丸去势手术造模，利用GC／MRM方法检测模型鼠及给予5a还原酶抑制剂的模型鼠一段时间的 收稿F1期：2008-04-02． 基金项目：国家自然科学基金(批准号90709045)资助． 联系人简介：罗国安，男，教授，博士生导师，主要从事生命分析化学方面的研究．E-mail：luoga@mail．tsin#ua．edu．cn 2156 高等学校化学学报 VoI．29 前列腺中睾酮及双氢睾酮浓度变化，得出两种治疗手段对前列腺中睾酮和双氢睾酮代谢影响． 1 实验部分 1．1仪器与试剂 CP一3800气相色