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定量PCR基本原理
Module1：实时荧光定量PCR技术原理
陈 涛
Field Application Scientist
Tel: 800 820 8982 / 400 820 8982
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1
什么是实时荧光定量PCR?
•一种实时监控核酸扩增的技术
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化对PCR过程进行
实时监控，以此实现对初始模板的定量分析。
2
定量PCR如何工作?
• PCR反应液加入了
各种类型的荧光标记物
一个PCR循环
3
定量PCR如何工作?
• 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强
PCR PCR
PCR 产物
大量PCR产物
4
定量PCR仪如何工作?
•所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分
2. 光路系统
3. 检测器
1. 热循环模块
5
定量PCR如何工作?
• 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增
加
循环1
滤光片A
样品1
Level:
6
定量PCR如何工作?
•最后,定量PCR软件计算出数据，用于实验结果的分析
7
定量PCR的数学原理
8
PCR动力学曲线和四个阶段
平台期
线性增长期
指数增长期
基线期
对数图谱 线性图谱
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