实用高效液相色谱法的建立-破解版.pdf

1 液相色谱方法开发 （实例讲解） 色谱分离与在线检测技术已经成为当今分析化学的一门重要学科，而因其衍生出的 相关产品也日益丰富 。对色谱工作者来说，在面对具体方法开发中如何获得适当的 分离度则成为关注的焦点。本文仅从网络上的资源收集简要介绍反相液相色谱法的 建立思路 。 一、一、 基本术语基本术语 一一、、 基本术语基本术语 读者可跳过本部分内容，直接阅读实例讲解部分 在评价色谱分离的品质时，通常用以下相关术语来反映色谱特征 （如图1.）： 图 1. 典型色谱图 1. 保留因子保留因子(k)： 保留因子保留因子 tR − t0 k = (1) t0 用于反映化合物的色谱保留性质，跟化合物性质有密切关系。如图 1，设 tR1 =3.65min, t =1.20min, 则峰 1 的保留因子为：(3.65-1.20)/1.20=2.04 0 2. 拖尾因子拖尾因子(T ) 拖尾因子拖尾因子 f 2010© 未经许可 ，不得复制。转载请注明出处。 如有问题请联系：ybsmart2004@163.com 2 液相色谱方法开发 （实例讲解） Wa +Wb Tf = (2) 2Wa 图 2. 典型拖尾峰 在理想情况下，色谱峰为高斯型对称峰，其拖尾因子为 1.0，但在实际情况中，由 于化合物的二次保留等其他因素，色谱峰大多会呈现一定程度的拖尾。如图 2 中， 该色谱峰的拖尾因子可计算得：{(41.5-37.0)+(37.0-35.0)}/{2*(37.0-35.0)}=1.63. 3. 理论塔板数理论塔板数 （N ） 理论塔板数理论塔板数 2010© 未经许可 ，不得复制。转载请注明出处。 如有问题请联系：ybsmart2004@163.com 3 液相色谱方法开发 （实例讲解） 图 3. 峰高与峰宽的关系 tR N =16( )^2 (3) W 或 tR N =5.54 ( )^2 (4) W0.5 注意：在上式中 W 为图 3 中的 W ，为基线峰宽(4σ) ，W