湖北工业大学生物制药学反义核酸.pdf

反义药物反义药物 主要内容主要内容主要内容主要内容 一一一一、、反义核酸与反义技术反义核酸与反义技术反义核酸与反义技术反义核酸与反义技术  反义核酸和反义技术概念反义核酸和反义技术概念  反义核酸的基本原理反义核酸的基本原理  反义核酸的种类反义核酸的种类反义核酸的种类反义核酸的种类 二、核酶技术及其应用二、核酶技术及其应用  反义核酸与反义技术的应用反义核酸与反义技术的应用  核酶概述核酶概述  核酶与核酶与核酶与核酶与RNARNARNARNA修复修复修复修复  核酶技术在临床上的应用核酶技术在临床上的应用  核酶技术核酶技术核酶技术核酶技术面面临的问临的问临的问临的问题题 反义核酸和反义技术反义核酸和反义技术反义核酸和反义技术反义核酸和反义技术  反义核酸反义核酸(antisense nucleic acid)(antisense nucleic acid) 是一段与靶基因的某段序列是一段与靶基因的某段序列 互补的天然存在或人工合成的核苷酸序列互补的天然存在或人工合成的核苷酸序列 它可通过碱基配对与细胞内核酸特异结合形成杂交分子，从而它可通过碱基配对与细胞内核酸特异结合形成杂交分子，从而 在转录和翻译水平调节靶基因的表达在转录和翻译水平调节靶基因的表达在转录和翻译水平调节靶基因的表达在转录和翻译水平调节靶基因的表达，，，，具有合成方便具有合成方便具有合成方便具有合成方便、、、、序列设序列设序列设序列设 计简单、容易修饰、选择性高、亲和力高等特点计简单、容易修饰、选择性高、亲和力高等特点  反义核酸技术（反义核酸技术（antisense nucleic acids technology)antisense nucleic acids technology) 是根据是根据 核酸杂交原理设计的，以选择性地抑制特定基因表达为目的的核酸杂交原理设计的，以选择性地抑制特定基因表达为目的的 一类核酸研究新技术一类核酸研究新技术 包括包括包括包括反义反义反义反义RNA(asRNA)RNA(asRNA)RNA(asRNA)RNA(asRNA)、、、、反义反义反义反义DNA(asDNA)DNA(asDNA)DNA(asDNA)DNA(asDNA) 、、、、核酶核酶核酶核酶(Rz)(Rz)(Rz)(Rz) 反义核酸的基本原理反义核酸的基本原理反义核酸的基本原理反义核酸的基本原理  绝大多数绝大多数DNADNA由两条碱基互补的单链组成，生物信息以核苷酸由两条碱基互补的单链组成，生物信息以核苷酸 不同排列顺序编码在不同排列顺序编码在DNADNA链上，基因组形成单顺反子结构链上，基因组形成单顺反子结构  在在DNADNA双链上被转录为双链上被转录为RNARNA的链为正义链，与其相对应的链为的链为正义链，与其相对应的链为 反义链反义链反义链反义链  精心设计一段寡核苷酸与正义链互补，一般由精心设计一段寡核苷酸与正义链互补，一般由77到到3030个核苷酸组个核苷酸组 成成成成，，将会阻断基因转录将会阻断基因转录将会阻断基因转录将会阻断基因转录；；或将含有反义序列的载体导入细胞内或将含有反义序列的载体导入细胞内或将含有反义序列的载体导入细胞内或将含有反义序列的载体导入细胞内，， 干扰特定基因表达干扰特定基因表达  利利利利用用这这这这一原理可以一原理可以在基在基在基在基因因位点位点位点位点、、前体前体前体前体mRNAmRNA、、 mRNAmRNA及蛋及蛋白水白水白水白水 平，通过干扰特定基因功能限制细胞增殖、分化和凋亡平，通过干扰特定基因功能限制细胞增殖、分化和凋亡 反义基因治疗反义基因治疗反义基因治疗反义基因治疗  利用人工合成的反义利用人工合成的反义利用人工合成的反义利用人工合成的反义RNARNARNARNA或或或或DNADNADNADNA导入靶细胞导入靶细胞导入靶细胞导入靶细胞，，控制细胞控制细胞控制细胞控制细胞 的中间阶段使编码蛋白的基因不能转录为的中间阶段使编码蛋白的基因不能转录为mRNAmRNA 或阻断或阻断