生物工程系人体及动物生理学试验报告.pdfVIP

生命科学学院 03 级 黎志林 2003301049 生物工程系人体及动物生理学 试验报告 学号：2003301049 姓名： 黎志林 年级：2003 级 实验日期：2005/6/7 第 五 组 组 员 ： 吕 广 辉 陈 钜 基 姚 伟 成 离体蛙心灌流的研究 黎志林 2003301049 【摘要】目的 学习斯氏或八木氏离体蛙心灌流法；观察Na+ + 2+ 、K 、Ca 及肾上腺素、乙酰胆碱等对离体心脏活动的 [1] + + 2+ 影响 。 方法 实验采取斯氏蛙心灌流法进行蛙心灌流，研究Na 、K 、Ca 及肾上腺素、乙酰胆碱等对离体心脏活 + + 2+ [2] 动的影响。 结果 Na 、K 、Ca 及肾上腺素、乙酰胆碱等均对蟾蜍的离体心脏产生显著的影响 。 前言：研究蟾蜍的离体心脏灌流，掌握Na+ + 2+ 、K 、Ca 及肾上腺素（Adr ）、乙酰胆碱(ACh)等对离体心脏活动的影 响。这些为以后学习人体生理学打下基础。这对人体急救也能提供一些帮助。 【关键词】 离体心脏 灌流 【基本原理】 心肌具有自动节律性收缩活动的特性，可用人工灌流的方法研究心脏活动的规律及其特点，还可通过改变灌 流液的成分或加入某些药物来观察其对心脏活动的影响。 1.实验材料与器材 蟾蜍、蛙心套管（斯氏套管或八木氏套管）、常用手术器械、蛙心夹、套管夹、记纹鼓及通用杠杆或记录仪 与张力换能器、万能滑轮、多用仪或刺激器、蜡盘、滴管、培养皿或小烧杯、任氏液、5%NaCl 溶液、2%CaCl2 溶液、1%KCl 溶液、1∶100000 肾上腺素溶液、1∶1000000 乙酰胆碱溶液、300u/ml 肝素溶液。 2.方法与步骤 2.1 离体蛙心的制备制备离体蛙心的方法有两种（即斯氏或八木氏离体蛙心灌流法）。本实验我们采取斯氏蛙 心灌流法。 2.1.1 取一只蟾蜍或蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按实验6暴露心脏。仔细识别心脏周围的大血管。在左 主动脉下方穿一线，距动脉圆锥2-3mm 处结扎。再从左、右两主动脉下方穿一线，打一活结备用。左手提起左主 动脉上的结扎线，右手用眼科剪在动脉圆锥前端，沿向心方向剪一斜口，然后将盛有少量任氏液（内加入一滴肝 素抗凝）的斯氏蛙心套管由此开口处插入动脉圆锥。当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖 端向动脉圆锥的背部后方及心尖方向推进。经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入）。不可插得过深，以 免心壁堵住套管下口。此时可见套管中液面随心脏搏动而上下移动，用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液， 提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管扎紧（不得漏液），再将结线固定在套管的小玻璃钩上。剪断结扎 线上方的血管。轻轻提起套管和心脏，在心脏下方绕一线，将左右肺静脉、前后腔静脉一起结扎，注意保留静脉 窦与心脏的联系，切勿损伤静脉窦，于结扎线的外侧剪去所有牵连的组织，将心脏离体。用任氏液反复冲洗心室 内余血，使灌流液不再有血液。保持套管内液面高度恒定（1.5—2cm），即可进行实验。 2.1.2 经常在心脏外壁滴加少量任氏液，以保持心脏湿润。 2.1.3 套管内液面高度对心搏活动的影响将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住心尖(不可夹得 过多，以免漏液) 。将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力换能器相连，后者接在 1 通道。注意勿使灌流液滴到换 能器上。开机并启动生理信号采集处理系统，在“实验项目”中选择“循环实验－蛙心灌流”，记