可见分光光度.PPT

气相色谱柱 由玻璃、石英或不锈钢制成的圆管，内装固定相 载体/担体 固定液 气液色谱柱 固定液 热导检测器TCD 原理：基于样品与载气的导热系数差异 当R2、R3、R4和E固定不变时，U的大小取决于R1 以热导池取代R1。热导池由不锈钢制成的中空池体（载气通路）及电阻丝构成，两者之间存在温差（人为设定） 载气以恒定流速通过池体时会建立动态的传热平衡，此时电阻丝阻值恒定，信号U恒定（基线，可人为调0） 当载气中混有组分时，因组分与载气导热能力不同会导致传热平衡破坏，电阻丝阻值改变，从而信号U发生相应的改变（形成色谱峰） 影响TCD灵敏度的因素： 电阻丝（桥电流控制，尽可能高）与池体（尽可能低，但不能低于柱温）温差； 载气种类（与样品的导热能力相差越大越好，H2、He） 热导池体积等其他因素 色谱流出曲线及定性定量基础 进样 非滞留组分 组分 tr是色谱定性的基本依据：相同色谱条件下，同一物质的tr相同（反过来不成立！） 有的检测器自身具有定性能力如质谱、红外等 定量基础：A=k?m 定量方法：外标法、内标法、归一化法 归一化的基本要求：全部组分都出峰（分离且被检测） fi：相对校正因子，仅与检测器有关，可查手册或用标准品求得。 组分分离是进行定性/定量的前提！ 影响分离的因素有哪些呢？ 分离度及其影响因素（1） 分离度的定义式（R=1.5既可认为完全分离） 分离度及其影响因素（2） 影响分离度的因素：色谱分离方程 ?n：柱效，又称塔板数，等于色谱柱长L除以板高H A 、B、C与填充物粒径大小及分布、规则程度、填充状况、载气及固定液组成、固定液膜厚度、流速、柱温（柱温?，B?，C?）等有关。 ?：选择性因子（?1），与组分、固定相及柱温有关（柱温?，??） k：保留因子/容量因子，与组分、固定相、两相体积比及柱温有关 实际色谱体系，除柱温外，其他影响R的因素已被事先优化。 气相色谱仪器的基本操作 开启载气（调节压力即可控制流速） 开气相色谱仪主机和计算机（软件可记录、处理数据及控制仪器） 利用主机控制面板设置初始条件（进样口温度、柱温、检测器温度；TCD检测器要设定电阻丝的电流） 稳定仪器（标志：基线稳定，波动不大且没有明显单向变化趋势） 进样分析（掌握微量进样器的使用）并记录相关数据 关机（测定完成并待基线稳定后，关机，与开机顺序相反：先将桥电流设为0，然后将柱温、进样口和检测器温度设定为室温，等待柱温降至室温后关机，最后关载气） 本实验条件 色谱条件： 色谱柱：2 m?3 mm不锈钢填充柱；固定相：PEG20M 流动相：高纯N2 柱前压力： 流速： 进样口温度： 色谱柱温度： 检测器温度： 桥电流： 进样量： 试样： 乙酸乙酯、乙酸丁酯和乙酸戊脂（色谱纯） V乙酸乙酯：V乙酸丁酯：V乙酸戊脂=1:1:1（标样） 未知样（三脂混合，比例未知） 数据记录与处理 实验3-15 记录不同温度下标准样品中三种酯的保留时间、半高峰宽与峰面积 完成表格，观察柱温改变时保留时间、半高峰宽、峰面积（必须保证进样量完全一致才有讨论的意义）及分离度的变化趋势并总结规律。 实验3-16 记录标准样品和待测样品在相同条件（柱温： ）下的保留时间与峰面积 完成表格并详细写出计算过程。 自来水总硬度的测定 实验目的 掌握EDTA标准溶液的配制与标定方法； 熟悉金属指示剂的变色原理和使用原则，掌握对滴定终点的判断； 掌握 EDTA法测定水的硬度的原理和方法； 了解水硬度的测定意义和常用硬度的表示方法。 实验原理（1） 水的总硬度 定义：水中钙、镁离子的总浓度 测定方法：在pH10的氨性缓冲溶液中，以铬黑T（EBT）为指示剂，用EDTA（Y）标准溶液测定钙镁总量 表示： 等 适用范围：饮用水、锅炉水、冷却水、地下水及没有严重污染的地表水。 实验原理（2） EDTA标准溶液的配制与标定 乙二胺四乙酸（EDTA） EDTA标准溶液的配制 直接法配制：国标编号GB12593-90 标定法配制：用分析纯EDTA粗配至所需浓度，在用Zn、ZnO CaCO3等基准物质标定出准确浓度。 在可选择的情况下，应使标定和测定条件尽可能接近 配位滴定实验所用“纯水”应为去离子水 a. 可与大多数2价及以上金属离子稳定配位 b. 配位比通常为1:1（MY） c. MY稳定性不同，有可能实现分别测定 d. 实际中采用EDTA二钠盐提高其溶解度 实验原理（3） 金属指示剂 变色原理： 基本要求：?A、B颜色不同（合适的pH）；?反应快