多途径介导的小胶质细胞间钙波传递-生物化学与生物物理进展.PDF

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2014, 4 1(2): 179~ 184 多途径介导的小胶质细胞间钙波传递* ** 限 潘雷霆 刘 颖 邢梦溪 张心正 许京军 ( 开大学物理科学学院，泰达应用物理研究院，弱光非线性光子学教育部重点实验室，天津300457) 摘要 利用微局域机械力刺激，快速实时观察机械力引起的细胞间钙波传递，系统地研究了BV-2 小胶质细胞间钙通讯机 制 结果表明，在细胞种植密度较小且彼此未接触的情况下，旁分泌途径可介导BV-2 小胶质细胞间钙波传递 在细胞密度 较大且相互接触的情况下，旁分泌和间隙 接两种途径可共同介导胞间钙波传递 更为有趣的是，在体外发现BV-2 小胶质 细胞间存在通道纳米管类似物 接，也可介导小胶质细胞间钙波传递 综上所述，小胶质细胞间钙波传递可通过旁分泌、间 隙 接和通道纳米管类似物 接三种途径介导 关键词 BV-2 小胶质细胞，细胞间钙波，间隙 接，旁分泌，通道纳米管类似物 学科分类号 Q632，Q274 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2013.00007 钙离子是细胞内重要的第二信使分子，参与调 的机制目前仍不明确 BV-2 小胶质细胞系是反转 控细胞运动、形变、分化、增殖、转录等各种生理 录病毒感染原代培养的小鼠小胶质细胞而获得的永 病理过程[1-2] 细胞间钙波(intercellular calcium 生细胞系，基本具备了原代培养的小胶质细胞的形 [3] waves)作为一种有效的钙通讯机制 ，广泛存在于 学、表型以及各项功能特点，且易于培养，作为 [4] [5] [6] 平滑肌细胞 、骨细胞 、 经元细胞 、星型胶质 原代小胶质细胞替代模型已被广泛应用于小胶质细 [7-9] [25] 细胞 等细胞中 细胞间钙波传递的经典途径有 胞生理病理功能的研究中 本文应用快速钙荧光 [10-11] 两种，即旁分泌(paracrine)介导的胞间钙通讯 和 显微成像方法，在体外分别研究了稀疏培养和密集 间隙 接(gap j unction)介导的胞间钙通讯[7, 12] 但 培养的BV-2 小胶质细胞在微局部机械力刺激下钙 [13] 2004 年，Rustom 等 在大鼠嗜铬细胞瘤细胞之间 波传递，发现有三种途径可介导细胞间钙波传递 发现一种微小的丝状 接，直径50～200 nm 之间， 1 材料与方法 取名为通道纳米管(tunneling nanotubes，TNTs)，可 [14] 小胶质细胞的培养 传递线粒体 随后，更多研究表明，巨噬细胞 、 1 1 BV鄄2 [15] [16] 6 孔板内放入厚度为0.17 mm ，直径为25 mm 星型胶质细胞 、内皮祖细胞 等诸多细胞中也存 在通道纳米管类似物(TNT-like structures)[17-19]，可 的无菌圆形盖玻片 经胰酶消化处理的BV-2 小胶 [20] [14] [17] 质细胞吹散打匀，种植于含有 10% 胎牛血清 传递