.猪瘟防治的意义.pptVIP

猪瘟疫苗研究进展和防控 猪瘟疫苗的研究进展 OIE标准疫苗研究 目前，尚无适用的预防猪瘟的灭活疫苗，OIE推荐使用活毒疫苗和标记疫苗 。 各国使用较广的活毒疫苗有：中国的兔化弱毒疫苗株，又称中国株或C株、日本的细胞弱毒疫苗株GPE及法国Thiverval株。 猪瘟标记疫苗 目前已有两种标记疫苗获得了欧盟的注册。这两种疫苗均以猪瘟病毒的E2糖蛋白作免疫原。E2亚单位抗原可由经基因修饰的杆状病毒感染昆虫细胞后来生产，这种杆状病毒应整合有猪瘟病毒的E2基因。因而这种疫苗不含任何猪瘟病毒，同时杆状病毒已被灭活。 我国现在也正在进行猪瘟标准疫苗的研究。这是我国“十一五”计划的一个项目部分。这对于我国消灭猪瘟起着重要的作用。 我国基因疫苗的研究重点在缺失标记疫苗的研究 缺失标记疫苗研究的重要意义： 意义主要在以下3个方面：①近年来猪瘟流行和发病特点在世界范围内发生了很大变化,呈现周期性、波浪形的地区性散发流行的温和性猪瘟,其特点是:无名高热、症状不典型,持续性感染,出生仔猪先天性震颤和母猪繁殖障碍。用传统疫苗免疫常常造成免疫失败,甚至免疫次数增加和免疫剂量加大到600个兔体反应(我国规定是150个兔体反应)也不能预防其感染,且有蔓延之势。在妊娠早期接种疫苗常可通过胎盘感染胎儿,造成死胎或弱仔并成为持续性带毒者,造成新疫源。因此,必须研制安全有效的新型疫苗来加强猪瘟的免疫防制。 ②弱毒疫苗已延用了近40年,在长期的免疫压力下,猪瘟流行毒株已向远离疫苗毒的方向演化,这种流行毒株的变化趋势国内外情况基本一致。所以研制针对当前流行毒株的新型疫苗迫在眉睫。③注射普通弱毒疫苗已影响到国际贸易问题,因为在美国等发达国家已消灭了猪瘟,而欧盟国家也停止了弱毒疫苗免疫,他们采取扑杀的办法净化疫区。1996～1998年,荷兰等8个国家发生猪瘟,扑杀2000余万头猪,造成了巨大的经济损失。由于担心在普通免疫的“保护伞”下隐藏有猪瘟野毒,所以,美国、加拿大、欧盟等发达国家,严密注视其他国家的疫情,不从任何有猪瘟和注射猪瘟弱毒疫苗的国家进口猪类制品,主要原因是因为不能用血清学方法鉴别诊断猪群是感染了野毒还是注射了疫苗。中国已加入WTO,对外贸易迅速发展,不允许影响国际贸易的问题继续存在。因此,研究能鉴别是野毒感染还是疫苗免疫的标记疫苗已势在必行。 A基因工程亚单位标记疫苗 利用基因工程的方法克隆得到编码病毒保护性抗原的基因, 在体外对其进行改造或修饰,并重新转移到异源生物宿主 体内或培养细胞中,使病毒蛋白获得大量表达。利用真核 细胞高效表达系统来表达猪瘟病毒免疫原蛋白,并以此表 达产物为抗原可获得基因工程亚单位疫苗 优点： 1目前所建立的诊断方法多是以猪瘟病毒E0基因表 达蛋白为抗原，E2囊膜糖蛋白的亚单位标记疫苗 接种猪不会产生针对E0的抗体，而自然感染猪则 产生针对E0的抗体，从而达到区别诊断的目的。 2由于该疫苗生产技术具有安全、稳定、可规模化等优点, 同时又根据流行毒的变化,更换合适的E2基因,因此,具有广 阔的应用前景。　　 B猪瘟C株突变株标记疫苗 构建猪瘟兔化弱毒株的感染性克隆，在ｃDNA水平上缺失某些与病毒复制无关的毒力或毒力相关基因后,其毒力丧失或明显减弱,但病毒复制能力并不丧失,同时保持着良好的免疫原性。因此,通过基因工程技术，致使病毒基因组中负责毒力的基因缺失,可以获得基因缺失型弱毒疫苗株。 优点：1：采用缺失的方法可能会制造出免疫原性好,且在安全性上更有保证的弱毒疫苗株,也可以改造现行的免疫原性还不能令人满意的弱毒株以增强其安全性。2：对猪瘟兔化弱毒进行改造，使其缺失或替换某一段基因，而其免疫原性不改变，缺失或替换的基因所表达的蛋白则可作为诊断抗原，从而达到疫苗接种猪和自然感染猪相区别。 猪瘟基因工程活载体疫苗研究 某些病毒基因组的某一核苷酸序列,将其切除、突变或在该区域内插入外源性基因片段后,均不影响病毒的复制,是病毒的复制非必需区。利用基因工程的方法可以将该复制非必需区克隆出来,体外改造后再将异源性病毒的保护性抗原基因及启动子调控序列等插入其中,通过体内同源重组技术获得重组病毒,利用该重组病毒接种动物,不仅可以诱导机体产生针对异源性病毒的特异性免疫反应,而且在采用宿主特异性载体病毒时,能够使宿主获得针对与载体病毒相应毒株的免疫力。如果在载体病毒中同时插入多个异源性病毒的保护性抗原基因还可以达到一针防多病的目的。目前用于表达猪瘟外源性病毒蛋白的载体包括痘病毒、伪狂犬病病毒、腺病毒、乳多空病毒、口疮病毒、疱疹病毒和小RNA病毒等。 多将猪瘟病毒的E1，E2基因插入到载体病毒上获得活载体重组疫苗。 但是,目前对此类疫苗的安全性和实用价值目前还有争议,因为人类至今还不了解病毒的自然发生及变异机制,也就无法控制这类“人