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2017-10-06 发布于江苏
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2016-2017 产品目录 09 转染试剂基因转染技术简介 323 ◆Lipofect 转染试剂(RM201) 324 ◆DNAfectin 转染试剂(RM202) 325 ◆RNAfectin 转染试剂(RM203) 326 ◆TianFect 转染试剂(RM204) 327 转染常见问题分析 328 基因转染技术简介 N N 目前最常见的转染方法有如下几种，建议根据实验条件，选择最佳的转染方法。 E E 磷酸钙共沉淀法 N G G E N 将氯化钙、DNA 和磷酸缓冲液混合，形成包含 DNA 且极小的不溶的磷酸钙颗粒沉淀。磷酸钙 -DNA 复合物颗粒沉 G A N 淀粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转染的成功至关重要。在 N I A I 实验中使用的每种试剂都必须小心校准，保证质量，因为偏离最优条件十分之一的 pH 值都会导致磷酸钙共沉淀法转染的失败。A T T I T N 电穿孔法 E 电穿孔法通过将细胞暴露在短暂的高场强电脉冲中转导分子。将细胞悬浮液置于电场中会诱导沿细胞膜的电压差异， G 据研究认为这种电压差异会导致细胞膜暂时穿孔。电脉冲和场强的优化对于成功的转染非常重要，因为过高的场强 N 和过长的电脉冲时间会不可逆地伤害细胞膜而裂解细胞。一般而言，成功的电穿孔过程都伴随高水平（50% 或更高） N A 的细胞死亡率。 N E I E T DEAE- 葡聚糖法或polybrene 法 G