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.维生素d与糖尿病的联系研究方案
糖尿病 (diabetes mellitus) 定义:一种在遗传和环境因素长期共同作用下,由于胰岛素分泌绝对或者相对不足所导致的渐进性蛋白质、脂肪、水和电介质代谢发生紊乱的一系列综合征,其中以高血糖为主要标志。 Ⅱ型糖尿病患病率特点 2型糖尿病患者约占糖尿病患者总数的90%,多发生于四十岁以上的人群和老年人,近年其发病年龄有下降趋势。 患病率急剧增加 血糖升高,但未达到糖尿病诊断标准者大量存在 各地发病状况差异巨大 农村城市化,糖尿病患病率增加 Ⅱ型糖尿病发病年龄的年轻化 逐代年轻现象:子代发病年龄低于父母 近年来儿童2型糖尿病患病率迅速增加,值得关注 维生素D与Ⅱ型糖尿病 Ⅱ型糖尿病风险人群总体血清维生素D水平低于非风险人群。 伴有轻微肾功能不全的Ⅱ型糖尿病患者,其心血管疾病的发病率与其维生素D水平呈负相关。 与那些维生素D浓度高于13.9 nmol/L的患者相比,严重缺乏维生素D(少于13.9 nmol/L)的患者死亡的可能性要高103%,死于心血管疾病的可能性要高95%。? 维生素D与Ⅱ型糖尿病的相关研究 非籍美国黑人患NIDDM的比例较高,同时他们的维生素D缺乏率也很高,而补充维生素D对他们的NIDDM也存在一定的治疗作用。 ——The potential to improve diabetes control with vitamin D replacement in African American patients: case report and literature review 人们一直认为,维生素D含量高可能会增加人们患II型糖尿病的风险,但我们的研究并没有发现这方面的证据。?克内克特博士所进行的追踪研究中,共有187人患上II型糖尿病。统计数据显示,当获取的血液样本排除了年龄、性别和季节因素后,血液中维生素D含量和罹患II型糖尿病的关系与之前的看法截然相反 。 ——芬兰赫尔辛基国家公共卫生研究所的保罗·克内克特博士 维生素D预防Ⅱ型糖尿病的机制 维生素D在代谢综合征中有重要作用,具有改善胰岛素敏感性作用的潜力。 维生素D可以令人体免疫系统保持健康,保护人体细胞免遭损坏,如产生胰岛素的胰腺细胞。 肥胖人群中2型糖尿病发生率增加,也和维生素D有关:一方面,维生素D易于在人体脂肪沉积,但不再具有生物活性;另一方面,维生素D可以调节脂肪细胞储脂作用。 创新之处及目的 目前,关于2型糖尿病的研究有很多,但大多数都是研究如何治疗的。如果可以通过一些简单的方法来预防它在人群中的发生,效果将更好。从以上的介绍中可以看出维生素D与2型糖尿病的发生似乎存在一些关系,所以,针对这一问题,我们小组设计了这项实验,来探索维生素D对NIDDM的发生究竟有什么作用。 我们推断不同浓度的维生素D对机体的作用不同,大剂量维生素D或维生素D缺乏都可能会促进NIDDM的发生,而少量的维生素D会减少NIDDM的发生。如果结论得到证实,那么,对易于发生维生素D缺乏或过多的人群相应的补充或降低维生素D的摄入,将对这类人群NIDDM的发生起到一定的预防作用。 二、技术路线 实验步骤 1、模型的建立:取只体重在20~25g的健康雄性小鼠,连续7d腹腔注射STZ(20 mg·kg-1),期间喂食高热量食物。分别于注射STZ的第1、2、3、4、6周末各测一次血糖,以血糖水平持续高于11.1mmol/L为判断成模的标准。造模期间死亡动物不计入统计范围。 2、动物分组:每组30只小鼠(实验在相对较暗的环境中进行) 糖尿病组,隔日腹腔注射花生油(5μg·kg-1),共14次;连续7d腹腔注射STZ(20 mg·kg-1);分别于注射STZ的第1、2、3、4、6周末各测一次血糖,以血糖水平持续高于11.1mmol/L为判断成模的标准,期间喂食高热量食物。造模期间死亡动物不计入统计范围。 少量Vd组,隔日腹腔注射1,25-(OH)2D3(2μg·kg-1),共14次; 连续7d腹腔注射STZ(20 mg·kg-1),期间喂食高热量食物。 大量Vd组,隔日腹腔注射1,25-(OH)2D3(5μg·kg-1),共14次; 连续7d腹腔注射STZ(20 mg·kg-1),期间喂食高热量食物。 空白对照组,隔日腹腔注射花生油(5μg·kg-1),共14次;连续7d腹腔注射与糖尿病组等容量柠檬酸盐缓冲液,期间喂以正常食物。 3、样本采集与处理:实验第9周,开始记录一周内各组小鼠的尿量和饮水量。第9周结束后,各组小鼠空腹8小时后,测糖耐量。之后,断尾取血用便携式血糖仪检测血糖水平;采集血清用胰岛素ELISA 检测试剂盒检测血清胰
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