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病理实验技术考试题
组织切片的主要程序:
1 取 材 2 固 定 3 洗 涤 4 脱 水 5 透 明 6 浸 蜡 7 包 埋 8 切 片 9 贴 片 10 烤 片 11 染 色 12浸洗脱水透明
5,非组织切片法 组织不经过切片手续制成的观察标本的方法为非组织切片法。
包括:涂片、压片、铺片、磨片、消化分离、活体标本、整装标本、血管注射标本。
6, 标本主要来源及取材的要求、取材主要注意事项?
来源:临床活体检查,手术切除,病理解剖,实验动物等
要求:1、根据实验目的和要求及病变程度合理取得组织材料。2、取材的过程迅速、准确
组织取材注意事项1.材料保持新鲜2.标本大小适宜3.勿使组织块受挤压4.尽量保持组织的原有形态5.选好标本切面6.保持材料的清洁7.切除不需要部分8.明确编号,登记
7,何谓脱水,脱水的目的、常用脱水剂及脱水注意事项。
定义:利用某种化学试剂逐步将标本内部吸收的水分置换出来,以使标本处于无水状态,这一过程叫脱水。
目的和原则1有利于标本的下一步处理,即透明、浸透、包埋 2有利于切片的操作 3有利于标本的长久保存 常用的脱水剂:1.单纯脱水剂:如乙醇、丙酮和甲醇 2.脱水兼透明剂:如正丁醇、叔丁醇等
注意事项:脱水时必须由低浓度脱水剂开始,逐步转入高浓度脱水剂,经过各级浓度的脱水剂使其所含的水分逐渐减少而代之以脱水剂。防止组织过度收缩变形,或脱水不完全而影响制片效果。
8,浸蜡组织经媒剂的透明作用之后,移入熔化的石蜡内浸渍,石蜡逐渐浸入组织间隙,取代透明剂,这一程序就叫浸蜡。根据所用石蜡的熔点,浸蜡需要能够保持于54-60.C温箱内进行。,
9,包埋,就是将已经经过固定,脱水,透明,浸蜡的组织块从最后的蜡浴取出置入充满熔融石蜡的包埋框内,包埋成块,使组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却,这个程序称为包埋。包埋剂凝固后,进一步加强了组织的硬度和韧度而便于进行切片。
10,切片机的基本类型的五种,按其结构叫做
(1)摇动式切片机,
(2)轮转式切片机,
(3)滑动式切片机,
(4)推动式(雪橇式)切片机,
(5)冰冻切片机。普通最常用的是轮转式切片机。
11 ,HE 染色步骤?
HE 染色的步骤:二甲苯I10min 二甲苯II10min 100%乙醇I2min 100%乙醇II2min 95%乙醇 2min80%乙醇 2min70%乙醇 2min苏木素染液 1-5min0.01%盐酸 20s 自来水稀氨水 (1%) 泛蓝 30s自来水伊红染液 1-5min70%乙醇 30s80%乙醇 30s95%乙醇 1min100%乙醇I2min 100%乙醇II2min 二甲苯 I2min 二甲苯 II2min 封片
用什么方法鉴别胶原纤维和肌纤维?其染色步骤?
鉴别胶原纤维和肌纤维的方法是 VG 染色和 Masson 三色染色。 1 VG 染色操作方法:○组织固定 10%甲醛,常规脱水包埋切片。 2 ○切片脱蜡至水。 3 ○weigert 氏铁苏木素液 5-10 分钟。 4 ○流水稍洗。 5 ○1%盐酸酒精迅速分化。 6 ○流水冲洗数分钟。 7 ○Van Giesom 氏染色液 1-5 分钟 8 ○倾去染液,直接用 95%酒精分化和无水酒精脱水,二甲苯透明。 9 ○中性树胶封闭。 VG 染色结果:胶原纤维呈鲜红色;肌纤维胞质及红细胞黄色;细胞核:蓝黑色。 1 MASSOM 染色步骤:○组织常规固定、脱水、包埋、切片。 2 ○切片脱蜡至水。 3 ○Weigert 氏铁苏木素液 5-10 分钟。 4 ○流水稍洗。 5 ○1%盐酸酒精迅速分化。 6 ○流水冲洗数分在封闭。 7 ○丽春红酸性品红液 5-10 分钟。 8 ○蒸馏水稍冲洗。 9 ○1%磷钼酸水溶液处理约 5 分钟。 10 ○直接用苯胺蓝液或亮绿液 5 分钟。 11 ○1%冰醋酸处理 1 分钟。 12 ○95%酒精脱水多次,二甲苯透明。 13 ○中性树胶封片。 Masson 三色染色结果:胶原纤维绿色或蓝色;肌纤维及红细胞:红色;细胞核:蓝色。
染色的目的,普通染色、特殊染色、复染色定义。
染色的目的:将标本切片浸于染色剂内,经一定的时间,使组织或细胞及其他的成分被染上不同的颜色,产生不同的折射率,便于在光镜下进行观察。
普通染色:最广泛应用的是苏木精和伊红染色,又称常规染色。
特殊染色:为显示特定的组织结构或其他的特殊成分。
复染色:衬托主染色所进行的染色。
胶原纤维的染色应用:
(1)器官硬化性疾病的观察:如肝硬变、心肌瘢痕的观察,胶原染色更易于观察诊断。 (2)瘢痕与淀粉样物质鉴别:前者胶原纤维染色为阳性,后者
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