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血细胞分析仪维修与开发技术 血液是维持人体正常生理活动的重要物质,它向全身各组织供应氧气,调节各器官的生理活动,抵御有害物质和病菌的侵害,常称为“生命之河”。人类生理和病理的变化,往往会引起血液组份的变化,可为医生提供诊断与治疗疾病的重要依据。血细胞计数与分析就是了解血液组份的一种方法,它已成为各级医院进行血液常规检验的必做项目之一。 1、血液的组成、特点及血细胞计数参数 血液由血浆和血细胞组成,血浆是血液的液体部分,除了水分之外,还有许多化学物质。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板,其中红细胞的数量最多。血浆的基本组成如下表 人类生理或病理的变化与血液组份的变化息息相关,及时了解血液组份的变化,可为疾病的诊断、治疗提供重要依据。血液由血细胞和血浆组成,血细胞包括红细胞、白细胞和血小板,其中血细胞计数是指计数单位容积中红细胞、白细胞和血小板的数量,是了解血液组份的方法之一。所谓血细胞计数主要是指计数单位容积中红细胞、白细胞和血小板的个数。 红细胞在人体内的主要功能是携带氧气和部分二氧化碳,参与人体的气体交换。红细胞的数量最多, 成人男子红细胞的个数为旧制4.2×6.2×106个/μl,新制4.2×6.2×1012个/L;成人女子红细胞的个数为旧制4.2×5.4×106个/μl,新制4.2×5.4×1012个/L;红细胞的直径在6-9μm之间,平均为7.2μm血红蛋白存在于红细胞内,是红细胞的主要成分,其功能是结合氧气或部分二氧化碳,正常参考值成年男性为:120一160 g/L,成年女性为:110-150 g/L。 白细胞:被成为人体卫士,它可以防止外来微生物的侵害及其他感染。白细胞分5类:中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞和嗜碱性细胞。正常人的白细胞数目为旧制4.0×10.0×103个/μl,新制4.0×10.0×109个/L; 血小板有凝血和止血的功能。正常人的血小板数目为旧制1.0×3.0×105个/μl,新制1.0×3.0×1011个/L;平均直径2-3μm。 机体的某些病变,可通过血细胞计数反映出来。如贫血时,红细胞计数、血红蛋白浓度会低于正常参考值;化脓感染、急性炎症、组织坏死、肿瘤、急性失血时白细胞计数会高于正常参考值;病毒感染、某些药物或经常接触放射性物质会使白细胞计数低于正常参考值。又如,血小板低于(20-50) × 109/L会引起出血性疾病,而大于 1.0 × 1012/L又易形成血栓。总之计数血细胞显得非常重要,临床上称之为血液常规。 传统的人工计数是将血液稀释后滴在血细胞计数盘,在显微镜下肉眼观察。这种方法效率低,计数精度低,误差因人而异,通常在(5-10%)之间。随着检验工作量的增加和对精度要求的提高,这种传统方法远不能满足实际工作需要。50年代,随电子工业和计算机技术的发展,细胞计数器便应运而生,细胞计数器是实现细胞计数的一种仪器。 初期的计数器只计数红细胞、白细胞,称细胞计数器(Cell Counter),后来增加了一个光电比色系统测定血红蛋白。 随着电子计算机的普及、发展和应用,细胞计数器的分辨能力进一步提高,除了红细胞、白细胞计数外还可以对血小板进行计数,还能计算出红细胞指数,共可得到 8个参数,称全血计数(Complete blood count ,CBC)。 随着特殊溶血剂的应用,能将白细胞按体积分为2-3分群,即淋巴细胞、粒细胞和中间细胞群。这样,细胞计数检测的项目可多达18项,甚至在实现白细胞五分类后,细胞分析的参数多达20多项,由以前简单的细胞计数器成为名符其实的血细胞分析仪(hematology analyzer)。 近年随着激光技术的应用,令血细胞分析的工作原理从单纯的电阻法得到突破性的进展,出现了能进行多参数相关测量的流式细胞仪,它可测量细胞多项生化成分,如核酸、蛋白质、膜成分、酶活性等等,在基础医学与临床医学上有着广泛的应用。 2、细胞计数器 人们研究血细胞的计数问题时,其计数原理曾采用过变阻脉冲法、光电计数法、激光计数法等, 现在,因前者简单实用而被普及。仪器测量的细胞数量比手工方法在显微镜下测量的细胞数量要多约100倍,统计误差减少了约90%,提高了计数的精确度。 3、变阻脉冲法原理 1.变阻脉冲法血细胞计数原理 变阻脉冲法血细胞计数原理简称电阻法原理,是美国科学家库尔特(W.H.Coulter)1947年首先提出来的,故又称库尔特原理。电阻法计数在大多数细胞计数器中是利用小孔管换能器装置来实现 的,如图1-1所示 小孔管是在一块25—50 μm厚的红宝石或蓝宝石上打一小孔,然后将其粘接在一支玻璃管上而制成。小孔直径多为100 μm或 75 μm,单独用来测试血小板的小孔管,其孔径还要再细些。小孔多位于管底的侧面,所能测试的颗粒大小为小
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