Western blotting产品选择指南.pdf

GE医疗中国 ™ Amersham Western blotting 产品选择指南 蛋白样品制备 电泳 转膜 封闭 一抗孵育 二抗孵育 检测 数字化成像/胶片曝光 条带结果分析 高质量 Western blotting 带来全新体验高质量 Western blotting 带来全新体验 然而随着科研水平的发展和进步，以及对实验结果要求的不断提高，Western blotting向着高精确定量进步。 高质量的Western blotting试剂，使高精确定量成为可能，也使得应用Western blotting技术研究的领域得以拓宽。 使用Western blotting技术获得高质量的结果，主要有以下四个方面的要求： 高质量的信噪比 宽广的线性范围宽广的线性范围 高质量的信噪比 当需要检测蛋白含量与膜上样品量直接相关时，线 高质量的信噪比与很多因素有关，因此要多方面考 性范围就显得尤为重要。宽广的线性范围可以让您 虑影响因素，如较好的控制蛋白上样量，使用优质 在同一张膜上比较较弱蛋白条带和较强蛋白条带的 的抗体，优化调整一二抗稀释度及曝光时间等等。 信号。此时需要注意的是：1）强信号不能出现饱 使用高质量的曝光试剂可以降低抗体的使用量，有 和现象；2 ）检测限需要尽可能的低以保证弱信号 助于减少非特异性背景的产生。此外，使用CCD拍 能够被检出。（如下图所示） 照设备替代压片方法获取信号，也可以在短时间内 有效的优化曝光时间，获取高质量的图片。 持续稳定的信号持续稳定的信号 由于化学发光法是基于酶反应的方法，因此所发出 的化学发光信号会随着时间的延长而衰减（如下图 所示）。因此，酶反应所能持续的时间越长，信号 强度保持的越久，意味着蛋白条带、特别是微弱的 蛋白上样量的归一化蛋白上样量的归一化 蛋白条带经过较长的时间之后仍然可以被检出。检