全自动发酵罐枯草芽孢杆菌产淀粉酶实验报告.doc

20L全自动发酵罐枯草芽孢杆菌产淀粉酶实验 实 验 时 间：2012年6月17日—2012年6月28日 学 生 姓 名： xxxxxx 学 号： 院系： 生命学院 专 业： 生 物 技 术 指 导 教 师： 2012年月 日 三、实验步骤与方法 ……………………………………… 6 1、了解发酵罐系统的结构 ………………………………… 6 2、种子培养 …………………………………………………6 3、发酵罐空消 ………………………………………………6 4.PH电极与DO电极的首次校正……………………………… 8 5、发酵培养基的配置 ……………………………………… 9 5.1 培养基摇瓶试验 ……………………………………… 9 5.2 种子的摇瓶 ………………………………………… 9 6.装料 …………………………………………………… 10 7、实消 ………………………………………………… 10 8.PH电极与DO电极的再次校正………………………………10 9、接种 ………………………………………………… 11 10、设定发酵参数，运行发酵指令…………………………… 11 11、发酵过程中相关参数的记录……………………………… 11 12、发酵过程中取样及相关参数的测定…………………………12 （1）参数测定所需的溶液的配置………………………………12 （2）取样 …………………………………………………13 （3）样品处理……………………………………………… 13 （4）残糖含量测定（DNS法）……………………………… 13 （5）生物量的测定（比浊法）……………………………… 14 （6）淀粉酶发酵活力的测定………………………………… 14 （7）葡萄糖标准曲线的制作………………………………… 15 （8）麦芽糖标准曲线的制作………………………………… 15 13. 放料, 清洗罐体，空消，保养……………………………… 16 四、实验结果与讨论……………………………………… 17 五. 实验心得体会………………………………………… 26 实验目的要求： 掌握机械搅拌通风发酵罐的基本结构 发酵罐主体 蒸汽灭菌系统：正确把握各阀门的操作 通气系统 加热冷却循环系统：各管道联络关系 搅拌动力系统 智能控制系统 掌握发酵罐小试的基本操作，包括：培养基配制，灭菌，接种，参数设定 掌握发酵过程中的参数测定和在线控制，包括：pH，DO，温度，搅拌速度，生物量，残糖含量，产物生成量，消泡，CO2。 运用所学发酵工程基本理论分析发酵过程中的实验数据，讨论某一特定菌株的发酵规律。 二、 实验试剂和仪器 1、种子培养基：57＃培养基 试剂及药品：麸皮 50g 豆饼粉（牛肉浸膏/粉） 30g NaCl 2 g 蒸馏水、斜面培养的枯草芽孢杆菌 器材：1000ml烧杯、玻璃棒、100ml锥形瓶（20个）、天平、粉碎机、电热炉、高压灭菌锅、灭菌枪头、1000移液枪、酒精灯、75%酒精、棉球、无菌操作台、封口膜、橡皮筋、恒温摇床、1000ml锥形瓶、标签纸 2、发酵培养基： 试剂及药品： 麸皮 （3％） 320g 12水磷酸氢二钠（0.2％） 70.55g 硝酸钾 （0.2％） 28g 消泡剂（植物油）（0.3％） 42g 蒸馏水 器材：1000ml烧杯、玻璃棒、75%酒精、棉花、一次性口罩、打火机、厚手套、天平 3、发酵过程中相关参数的测定的药品、仪器： 试剂及药品：无水葡萄糖 0.1g NaOH 4g 3水乙酸钠 0.6804g 淀粉 1g 乙酸、蒸馏水、DNS、PH标准缓冲液、亚硫酸钠 器材：10mL具塞刻度试管（30个）、100ml容量瓶（2个）、200ml容量瓶（2个）、100ml烧杯、100ml试剂瓶（4个）、100ml锥形瓶（2个）、玻璃棒、1000ml烧杯、标签纸、电热炉、木夹、试管架、PH标准试纸、PH计、枪头、1000移液枪、恒温水浴锅、分光光度计、电子天平、烘箱、冰箱、上海高机SY-3000发酵系统 三、实验步骤与方法 1、了解发酵罐系统的结构 （1）．罐体 （2）．发酵罐的搅拌系统 （3）．空气供给系统 （4）．温度控制系统 （5）．pH控制系统 （6）．过程变