miR-100对裸鼠食管鳞状细胞癌移植瘤生长的影响.pdfVIP

出丕医垫兰Q!鱼生箜墨鱼鲞箜兰!翅 miR一100对裸鼠食管鳞状细胞癌移植瘤 生长的影响 张乃键1，蒋森2。吴钦良3，赵亚萍1 (1中国人民解放军第82医院，江苏淮安223001；2上海市东方医院； 3南京医科大学附属淮安市第一人民医院) 将人ESCC细胞株 摘要：目的观察miR．100对裸鼠食管鳞状细胞癌(ESCC)移植瘤生长的影响。方法 mm3左右时，将裸鼠随 Kysel50皮下注射裸鼠腋部，成瘤后将瘤块接种于21只裸鼠右侧腋下；待肿瘤体积增至200 rLs／mL的mimics—NC、转染剂100止，i 机分为A、B、c组各7只，分别于瘤内注射50恤∥mL的miR一100一mimics、50 次／d，连续21d。其间每隔ld测量并记录肿瘤体积，绘制肿瘤生长曲线；实验结束后剥离肿瘤组织，称量肿瘤质 量。结果 干预后第5—7天B、c组肿瘤快速生长，且随时间延长体积逐渐增大，与A组之间差异无统计学意义 干预后第2l天，A组荷瘤裸鼠移植瘤质量为(0．1 miR一100可以抑制ESCC裸鼠皮下移植瘤的生长。 ±0．472)g，差异有统计学意义(P均0．05)。结论 关键词：食管癌；微小核糖核酸一100；Kysel50细胞；移植瘤；抑制作用；裸鼠 1 doi：10．3969／j．issn．1002—266X．2016．38．01 中图分类号：R735．1文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2016)38-0035-03 食管鳞状细胞癌(ESCC)是食管癌的主要病 理类型，以高发病率和地域差异的病死率为特征。 公司。 微小RNA(miRNA)是一类小的非编码RNA，其在1．2实验方法 癌症发生和发展相关基因的调节中起重要作用。 1．2．1 细胞培养Kysel50细胞用RPMI1640培 近来越来越多的研究证实，异常表达的miRNA可养基加10％胎牛血清，在37℃含5％CO：的细胞孵 能在ESCC发病过程中起重要作用。本课题组前箱中培养。细胞每2—3d换液1次，待细胞融合至 期研究发现，miRNA一100(miR一100)显著低表达于 80％～90％时，以胰蛋白酶消化液消化成单个细胞 ESCC癌组织，且与ESCC淋巴结转移有关；体外研 用于传代，传代比例为l：3。经数代培养后，待细胞 究结果表明，miR一100过表达可显著抑制ESCC细 处于对数生长期时收集细胞。 胞迁移和侵袭，但对ESCC细胞增殖和凋亡均无明1．2．2肿瘤细胞悬液制备待细胞处于对数生长 显影响…。2012年3—6月，我们观察了miR．100 期时消化细胞，用吸管轻轻吹打，吸取100IxL细胞 对裸鼠ESCC移植瘤的作用，探讨miR．100参与 悬液至EP管内。加入t00“L台盼蓝染色液，轻轻 ESCC的机制。 吹打混匀，3—5min后取20斗L滴板计数。于大方 1材料与方法 格内计数未被蓝染的细胞总数，即为活细胞数。将 1．1 材料 人ESCC细胞株Kysel50购自美国模剩余细胞悬液吸入10 mL离心管中，平衡后将离心 式培养物集存库(ATCC)。BALB／c雌性裸小鼠30 000