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 HYPERLINK  黑色素分析指标的研究进展及其应用 原文地址：/view/3fc8c7a7b540e523f2f16b6bd1025dec.html 中国畜牧兽医２００８年第３５卷第５期生理生化?３１? 黑色素分析指标的研究进展及其应用 王鑫玉１，孙守荣２，周艳华１。曹绣娟１。谭玉文１，毛华明１。邓卫东１ （１．云南农业大学动物营养与饲料重点实验室，昆明 ６５０２０１；２．云南省怒江州兰坪县畜牧局，兰坪６７１４００） 摘要：动物体组织中的黑色素主要分为真黑素和脱黑素，应用红外光谱（ＩＲ）和高效液相色谱（ＨＰＬＣ）可以对黑色素进行定性及定量分析，并且该方法简单易行，应用广泛。作者总结黑色素的分类、定性、定量分析方法，并对ＨＰＬＣ的应用做了详 细阐述。 关键词：黑色素；真黑素；脱黑素；测定方法 中图分类号：Ｑ５０３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６??１－７２３６（２００８）０５－００３１一０４ ｌ黑色素的分类 黑色素是一种广泛分布于动植物体中的色素。Ｎｉｃｏｌｌａｕｓ（１９６８）根据黑色素降解产物的不同，将其分为吲哚型黑色素（动物黑色素）和儿茶酚型黑色素（植物黑色素）。动物黑色素又分为２类，第一类为真黑素（ｅｕｍｅｌａｎｉｎ），主要是呈黑色和褐色的由酪氨酸、二羟基苯丙氨酸（多巴）、多巴胺．．酪胺等氧化聚合而成的含氮分子，家禽黑羽或蓝羽、眼、皮肤、人的黑发、牛的眼睛、乌贼鱼的墨汁就大量含有这种色素（李华等，２００２）；第二类为脱黑素（ｐｈａｅｏｍｅｌａｎｉｎ），颜色稍浅，是棕色、红色甚至黄色的含硫大分子，由酪氨酸经上述同样路径合成而来，但需要半胱氨酸的参与，它在人的红头发、蓝眼睛、动物的红色毛发和家禽红羽、浅黄色羽毛等组织中大量存在（李华等，２００２）；植物黑色素被划分为第３类色素，即异黑素（ａｌｌｏｍｅｌａｎｉｎｓ），呈棕色或黑色，这种黑色素是在多酚氧化酶存在下通过多酚的氧化聚合而形成的，如土豆、苹果、甘薯等被损伤后，暴露在空气中其创伤面会逐渐变为棕色甚至黑色即是产生了异黑素（李兴旺等，２００１）。动物体组织中的黑色素并不是以单一的黑色素形式存在，而是真黑素和脱黑素两种类型的混合色素，所以表现出了皮肤及被毛的多种色泽。 ２黑色素的定性分析 由于黑色素常与蛋白质牢固结合及对可见光、紫外光吸收的特性，研究较难，目前常用化学降解法 （盐酸降解和酶法）提取．放射性同位素示踪法研究合成，仪器分析方法如Ｘ一射线衍射法、红外光谱法（ＩＲ），电子光谱学化学分析法（ＥＳＣＲ）、电子顺磁共振波谱法（ＥＰＲ）等对其结构进行研究。国内外许多学者都应用红外光谱（ＩＲ）来分析不同来源黑色素的结构。 ２．１ 电子顺磁共振渡谱法早在１９５４年Ｃｏｒｎ— ｍｏｎｅｒ在研究蛙卵的黑素组织工作中就提出黑素可以俘获自由基，并把他们稳定在黑素基质中，亦即说明黑色素中含有自由基。ＥＰＲ的工作原理是未成对电子在外加磁场中吸收微波辐射会改变电子自旋的状态，所以ＥＰＲ波谱可以用来检测自由基是否存在、自由基浓度、顺磁性物质的电子顺磁共振光谱及证明自由基的结构，波峰大小代表未成对电子含量的多寡。Ｒｅｅｄｙ（１９９８）、Ｍｕｒｏｙａ（２０００）都有报道说明黑色素中含有大量的自由基。袁缨等（２００２）对乌鸡黑色素的基本结构及特征研究表明，其ＥＰＲ波谱为轻微不对称的典型单线一次微商波普，无超细结构和电子自旋性，乌鸡黑素分子中自由基的含量为１０７／ｇ以上。对乌骨鸡鸡皮黑色素（ＳＳ－ｍｅｌａｎｉｎ）、乌骨鸡鸡冠黑色素（ＳＣ—ｍｅｌａｎｉｎ）、乌贼墨囊黑色素（ＳＥ—ｍｅｌａｎｉｎ）、章鱼墨囊黑色素（ＯＣ－ｍｅｌａｎｉｎ）和化学合成黑色素（ＳＹ—ｍｅｌａｎｉｎ）应用ＥＰＲ来检测未成对电子含量的强度，结果显示，不同种类的黑色素具有不同大小的波峰形式，其中以ＳＥ—ｍｅｌａｎｉｎ和０Ｃ—ｍｅｌａｎｉｎ有较大的波峰，表示其有较高的未成对电子含量的强度，其次为ＳＳ—ｍｅｌａｎｉｎ、ＳＣ－ｍｅｌａｎｉｎ及ＳＹ—ｍｅｌａｎｉｎ（林亮全等，２００４）。但应用ＥＰＲ对黑色 收稿日期：２００７—１１－０９ 素的研究具有很大的限制性。２．２红外光谱分析 目前，对于黑色素结构的了解 作者简介：王鑫玉（１９８３一），女，内蒙古人，硕士生，研究方向：分 子营养代谢与调控。 通讯作者：邓卫东．男．博十，副教授。 基金项目：云南省应用基础研究计划重点项目（２００６Ｃ０００５Ｚ）和 国家自然科学基金。 还很有限。Ｒｉｌｅｙ提出黑色素的基本结构是一些共价交联的吲哚环。同时含有不定量的吲哚前体物。袁缨等（１９９６）在泰和、江山及两者的杂交种３个来 万方数据　 ?３２?生理生化源的乌骨鸡组织中提取了黑色素并且做了理化特性的研究，其红外图谱表明乌骨鸡的特征吸收峰有５组，其中波长１６２３～１６１９／ｅｍ的