P63在肛门直肠畸形大鼠直肠发育过程中的表达及意义.pdfVIP

中国医科大学学报第42卷第2期2013年2月 ofChinaMedical V01．42No．2Feh．2013 ·97· Joumal University ·论著· P63在肛门直肠畸形大鼠直肠发育过程中的表达及意义 苏朋俊，袁宇航，张志波，黄英，王大佳 (中国医科大学附属盛京医院dqL夕l科，沈阳110004) 摘要 目的检测P63在正常和畸形胎鼠肛门直肠胚胎发育过程的表达，探讨其表达的意义。方法应用乙烯硫脲(ETU)致 面连续切片，P63免疫组化染色，连续动态观察P63在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠发育过程中的空间表达情况。通 过Westem mRNA和蛋白在aY-常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠的 blot和荧光实时定量PCR(qRT—PCR)方法分别研究P63 表达。结果 免疫组化结果：正常大鼠胚胎中，P63表达于尿直肠隔以及后肠、泄殖腔膜和尿生殖窦的上皮层。肛门直肠畸形组 大鼠胚胎中，在E13～E16，P63在尿直肠隔间质、后肠上皮层、泄殖腔膜或瘘管上皮层的表达减弱：Western blot和qRT—PCR定量 d和15d时 检测结果：在发育期的后肠中P63蛋白和P63mRNA的表达表现出时间依赖性，在肛f1形成的关键时期，即14 d明 P63的表达水平达到高峰，一旦肛门形成其表达量随即开始降低，畸形组与正常组比较，P63mRNA和蛋白的表达在14～15 显降低，差异有统计学意义(P0．05)。结论在正常大鼠泄殖腔和直肠胚胎发育过程中，P63存在着时空表达不平衡性的特 点；在肛门直肠形成的关键时期(13～16 d)，先天性肛门直肠畸形大鼠胚胎中P63基因表达下调可能与肛门直肠畸形的发生有 关。 关键词／)63基因；肛门，畸形；直肠，畸形；泄殖腔 中图分类号R726．2 文献标志码A 文章编号0258—4646(2013)02—0097—05 网络出版地址http：／／www．cnki．net／kcms／detail／21．1227．R1018．001．html RolesofP63inthe of AnorectalMalformationsinRat Induced Development Embryos by Ethylenethiourea SU Peng-jun，YUANYu—hang，ZHANGZhi—bo，HUANG Ying，WANGDa-jia ofPediatric (Dep,：crtment Medical Surgery，ShenNingHospital，China 110004，China) University，Shenyang Abstract TodetermineP63 anorectal innormaland Objective expressions anoreetal