p65小分子干扰RNA对THP-1细胞种植瘤生长及凋亡的影响.pdfVIP

史堡塞墅生[登盘查婴!!生!旦筮!!鲞筮!翅垦!i!』坠P!!坚：丛!竺!垫!!：y型：翌，堕!：! ·757· ·实验研究· p65小分子干扰RNA对THP一1细胞种植瘤 生长及凋亡的影响 王春美 卢洁 王颖超谢垒 方营旗 刘玉峰盛光耀 作者单位：450052郑州大学第一附属医院儿科 meichunl23@126．COB 通信作者：王春美，Email DOI：10．3760／cma．j．issn．1001-9030．2016．03．062 【摘要】 目的探讨p65小分子干扰RNA(siRNA)对BALB／c—nude裸鼠体内THP-1细胞种植 7个细胞／只)接种 瘤生长及凋亡的影响及其机制。方法将处于指数期生长的THP．1细胞(1×10 到BALB／c．nude裸鼠右腋皮下，建立THP．1细胞皮下种植瘤模型。随机分为3组：对照组、p65 siRNA治疗组(每只每次2斗g)、核因子．KB信号通路抑制剂Pathenolide(PN，每次10∥kg)治疗组， 隔日1次，共2周。隔日测量肿瘤体积，绘制肿瘤生长曲线；反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测瘤 组织中p65、核因子一KB抑制蛋白d(IKB俚)的mRNA表达，免疫组织化学检测瘤组织中p65、IKBot的 蛋白表达，原位缺口末端标记法(TUNEL)检测瘤组织细胞凋亡。结果(1)全部裸鼠于接种后7— 10 siRNA组、PN组中肿瘤于治疗的前5d内生长速度和对照 d成瘤，对照组肿瘤体积持续增大；065 组比较差异无统计学意义(P0．05)，第6天后肿瘤生长速度明显减慢，以p65siRNA组作用最为 siRNA组、PN组瘤重量分别为(1．34士0．30)、(0．61±0．24)、(0．89± 明显；(2)对照组、p65 siRNA组、PN组抑瘤率分别为54．56％、38．03％；(3)RT—PCR和免疫组织化学结果显 0．35)g，p65 示：p65siRNA组、PN组中p65mRNA和蛋白表达显著下降(P0．05)，IgBctmRNA和蛋白表达显著 siRNA 升高(P0．05)，以p65siRNA组作用最为显著(P0．05)。(4)TUNEL检测结果提示：065 4-3．97)％、(10．29 组及PN组中瘤组织凋亡细胞的阳性率[(17．95 4-2．74)％]显著增高(P 0．05)，以065siRNA组作用最为明显(P0．05)。结论成功建立THP一1细胞种植瘤模型；p65 siRNA可有效抑制THP．1细胞种植瘤的生长，并促进肿瘤细胞凋亡。 【关键词】p65；RNA干扰；种植瘤；脱噬作用 Effectof onthe and ofTI口一1 tumol葛 interfering心Agrowthapoptosis xenograft p酷smldl Chunmei，Lu Guangyao Wang Jie，WangYingchao，‰Lei，凡，lgYingqi，血uYufeng，Sheng First Pediatrics，￡k 450052，China Departmentof AffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity，Zhengzhou author：贶w∞unmei，Email：meichunl23@126．com Corresponding To th