TCB74细胞微量元素测定.pdf

细胞中微量元素含量测定 原子吸收光谱法测定细胞 中微量元素 原子吸收光谱分析 基本原理 基于从光源辐射出待测元素的特征谱线的 光，通过试样蒸气时，被蒸气中待测元素的基 态原子所吸收，根据特征谱线的光减弱的程度 来测定试样中待测元素含量的方法。 共振线：在原子吸收光谱中能被基态原子吸收的谱线。 2015/4/21 工作原理示意图 原子化器 高压电源 光源（空心阴极灯） 单色器 放大器 读数器 光源 光电倍增管 试样 分光系统 燃料气 检测系统 载气 单光束原子吸收光谱仪示意图 2015/4/21 光的吸收定律 I 0 A = log = k N l I A — 吸光度； I — 光源所发射的待测元素“共振线”的强度； 0 I — 被火焰中待测元素吸收后的透光强度； k — 原子吸收系数； l — “共振线”所通过的火焰长度； N — 蒸汽中基态原子的浓度； A = k C （原子吸收光谱进行定量分析的基本公式） 2015/4/21 原子吸收光谱仪 2015/4/21 原子吸收分光光度计 2015/4/21 自动进样器 2015/4/21 方法特点及应用 （1）干扰少准确度高 （2）仪器简单操作方便 （3）灵敏度高 （4）测定元素范围广 应用：痕量分析 冶金、地质、采矿、石油、化工、环境保护、 医药卫生等 2015/4/21 实例 火焰原子吸收光谱法测定淋巴细 胞中微量的铜和锌  1. 淋巴细胞的分离 抽取外用静脉血3.0 ml 以等渗氯化理溶液4׃1稀释后 以 Ficoll分离液分离淋巴细胞 以转速2000 rpm 分离30 min 。将分离的淋巴细胞层吸出 加4倍等渗氯化锂后以 转速1500 rpm 离心分离10 min 弃去上清液 加1.0 ml 超纯水轻轻振摇1 min 即加高渗氯化锂1.0 ml 振摇1 min 再加等渗氯化锂 清洗3遍 每次离心10 min 。用 等渗氯化锂0.12 ml加入经离心沉淀的淋巴细胞中轻轻振 摇 使其成为均匀的悬浮液 从中吸取0.02 ml计数 另 吸出0.1