预防医学分子生物11习题（副本）.docx

RNAi发卡式载体构建及转化1．利用反向遗传学研究基因功能的策略有哪些？2．RNAi的分子机制。3．RNAi 的生物学意义如何？PCR法克隆目的基因全长若克隆某基因全长，在进行引物设计时，有哪些需要特别注意的事项？一个PCR循环的步骤？PCR反应体系的重要组成？序列测定6.　简述Sanger双脱氧链终止法进行DNA序列分析的基本原理，并将下列DNA测序胶片的结果（正向引物测序），从5’?3’写出合成链的DNA序列。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质1．SDS - PAGE测定蛋白质的分子量的原理是什么？2．SDS–PAGE是变性条件下的蛋白质电泳，如果进行保持蛋白质天然特性的非变性电泳其与SDS有什么主要区别？双向电泳分离蛋白质6.　常用的双向电泳，第一向采用　　技术，根据　　来分离蛋白质；第二向采用　　技术，根据　　来分离蛋白质。免疫印迹检测目的蛋白质的表达Western Blotting 检测目的蛋白质表达的原理？Southern杂交2. 探针为什么要进行100 ℃变性处理？4.　探针：能够与靶分子特异结合的核酸分子，带有供杂交后检测的合适标记物。5.　核酸分子在高于等电点的pH溶液中带＿＿＿＿电荷，在电场中向＿＿＿＿极移动。6.　核酸电泳时＿＿＿＿用TAE缓冲液，＿＿＿＿用MOPS缓冲液（选填：DNA、RNA）。RNA的提取与Northern杂交1．RT-PCR反应过程中经常使用哪几种引物？2．阐述Northern杂交过程中的主要实验步骤和相关注意事项。3.　Northern杂交可以测定总RNA或poly(A)+RNA中特定mRNA分子的＿＿＿＿（选填：表达丰度、基因拷贝数）。4.名词解释：Northern杂交，　　　　探针原位杂交分析1．原位杂交、Northern Blot 杂交和RT-PCR均可以检测组织中特定基因的表达，三者有何异同？第十九章分子生物学常用技术一、单选题1. “Sourthern Blotting”指的是√(A) 将DNA转移到膜上，用DNA做探针杂交 (B) 将RNA转移到膜上，用DNA做探针杂交(C) 将DNA转移到膜上，用蛋白质做探针杂交 (D) 将RNA转移到膜上，用RNA做探针杂交(E) 将DNA转移到膜上，用RNA做探针杂交2. 分子杂交试验不能用于(A) 单链DNA分子之间的杂交 (B) 单链DNA与RNA分子之间的杂交(C) 抗原与抗体分子之间的结合√(D) 双链DNA与RNA分子之间的杂交(E) RNA与RNA之间的杂交3. 探针是经过什么标记的核酸分子(A) 用放射性同位素标记 (B) 用生物素标记 (C) 用地高辛标记√(D) A、B、C都对 (E) 用抗体标记4. 下列哪一条在分子印渍技术中不适用(A) DNA向NC膜转移 (B) 蛋白质向PVDF膜转移 (C) DNA向尼龙膜转移(D) RNA向NC膜转移√(E) 蛋白质向一号滤纸转移5. 用于核酸杂交的探针至少应符合下列哪条(A) 必须是双链DNA (B) 必须是双链RNA√(C) 必须是单链DNA (D) 必须是 100bp以上的大分子DNA (E) 必须是蛋白质6. 核酸斑点杂交试验中可省略的步骤是√(A) 电泳 (B) 核酸样品固定于NC膜 (C) 杂交信号检测 (D) 标记探针 E) 制备样本核酸7. 免疫印渍技术中不适合应用的步骤是(A) 聚丙烯酸胺凝胶电泳 (B) 用NC膜或PVDF膜√(C) 靠毛细管作用进行转移 (D) 用同位素标记抗体(E) 用非同位素标记抗体8. 原位杂交是指(A) 在NC膜上进行杂交操作√(B) 在组织切片或细胞涂片上进行杂交操作 (C) 直接将核酸点在NC膜上的杂交 (D) 在PVDF膜上进行杂交操作 (E) 在凝胶电泳中进行的杂交9. 有关DNA链末端终止法的不正确说法是√A) 需要ddNMP (B) 需要ddNTP (C) dNTP：ddNTP的比例要合适 (D) 需要放射性同位素或荧光染料(E) 需要dNTP 10. 有关DNA序列自动化测定的不正确叙述是(A) 用荧光代替了同位素标记 (B) 激光扫描分析代替人工读序 (C) 基本原理与手工测序相同√(D) 不再需要引物 (E) 需要与手工序列分析相同的模板11. 某种遗传性疾病是由一个点突变（无限制性内切酶位点变化）引起，可以√(A) 用DNA单链构象多态性分析突变 (B) 用限制性片段长度多态性分析突变 C) 用Western Blotting分析突变 (D) 用电泳分析基因组DNA (E) 用电泳分析细胞中的所有蛋白质12. 免疫印渍技术指的是√(A) 结合在膜上的蛋白质分子与抗体分子结合 B) 结合在膜上的DNA分子与抗体结合 (C) 结合在膜上的RNA分子与抗体结合 (D) 结合在膜上的DNA分子与RNA分子结合