单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒 SEA087Hu使用说明书剖析.pdf

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SEA087Hu 96T 单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒 (酶联免疫吸附试验法) 适用生物:人 使用说明书 仅供体外研究使用,不用于临床诊断! 第12版 (2016年05月修订) [预期应用] 本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物 液体中MCP1含量。 [试剂盒内容] 试剂名称 数量 试剂名称 数量 96孔板 (预包被) 1 96孔板覆膜 4 标准品 2 标准品稀释液 1×20mL 检测溶液A 1×120μL 检测溶液A稀释液 1×12mL 检测溶液B 1×120μL 检测溶液B稀释液 1×12mL TMB底物 1×9mL 终止液 1×6mL 洗涤液 (30×) 1×20mL 使用说明书 1 [需自备的设备及试剂] 1、450±10nm滤光片的酶标仪 (建议仪器使用前提前预热) 2、单道或多道微量移液器及吸头 3、稀释样品的EP管 4、蒸馏水或去离子水 5、吸水纸 6、盛放洗液的容器 7、0.01mol/L (或1×)磷酸缓冲盐 (PBS),pH 7.0-7.2 [试剂盒的储存及有效期] 1、 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶 液A、检测溶液B 以及96孔板保存于-20C,其余试剂请置于4C保存备用。o o 2、 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,此外,请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝 箔袋装好,并拉紧密封铝箔袋,置于-20C保存。o 注意: 试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产 品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。 [标本的采集与保存] 1、 血清:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4C过夜,然后1,000×g离心20分钟,取上o 清即可,将上清置于-20C或-80C保存,避免反复冻融。o o 2、 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8C 1,000×g离心15分钟,o 取上清即可检测,或将上清置于-20C或-80C保存,避免反复冻融。o o 3、 组织匀浆:不同类型的组织制备匀浆的方法会有所不同 1) 取适量组织块,在预冷PBS (0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,匀浆前先称重。 2)将组织切成小块,均匀的放入放置在冰上的装有新鲜裂解缓冲液(货号IS007,应依据目标蛋白的亚细胞定 位选择不同类型的缓冲液)的玻璃均质器中 (微小的组织也要如此)。 (质量体积比 1:20-1:50,例如: 1mL裂解缓冲液中加入20-50mg组织样本。) 3) 将得到的悬浊液经过超声处理至澄清。 4) 将制备好的匀浆液10,000×g离心5分钟,弃沉淀,上清即可用于检测或置于-20C下保存。o 4、细胞裂解液:在分析试验之前,细胞需

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