病毒性肝炎标志物检测讲述.ppt

病毒性肝炎标志物检测 孙国宏 Hepatitis B Virus 乙型肝炎的病原体 在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染 中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8% 抗原组成(一)--HBsAg 位于病毒表面，是一种糖蛋白 4种亚型(adr,adw,ayr,ayw) 欧美国家: adw 我国汉族: adr 我国少数民族: ayw 判断HBV感染的指标之一 刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs 抗原组成(二)-- HBcAg 位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易检出游离的HBcAg 主要成分是蛋白质 刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体) 在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗-HBc 抗-HBc IgM常提示病毒处于复制状态 抗原组成(三)-- HBeAg 位于HBV的核心,是一种可溶性蛋白抗原 HBeAg和Dane颗粒出现相平行，且与DNA多聚酶在血中的消长动态相符合 血中HBeAg的出现可作为HBV复制及血清有感染性的指标 刺激机体产生抗-HBe 抗-HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合,通过补体介导破坏受染的肝细胞,抗-HBe的出现是预后良好的征象 抗原组成(四)-- Pre-S抗原 位于HBV的外衣壳上，有两种 刺激机体产生抗Pre-S1和抗Pre-S2，能阻断HBV与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒的作用 抗Pre-S1和抗Pre-S2的出现，表示病情好转，趋向痊愈 传染源 患者 潜伏期 急性期 慢性期 无症状HBsAg携带者 病原学诊断(一)--抗原抗体检测 项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM 方法 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性) 发光免疫分析(定量) 反相间接血凝试验(少用) ELISA的基本原理 利用抗原和抗体特异性结合 主要的试剂 固相抗原或抗体 酶标记的抗原或抗体 酶的底物 病原学诊断(二)—核酸检测 核酸杂交 探针 PCR 引物 HBsAg – 感染的标志 Anti-HBs – 既往感染/接种疫苗 Anti-HBc IgM – 急性感染标志 Anti-HBc IgG – 既往或慢性感染 HBeAg – 急性病毒复制，有传染性 Anti-HBe –病毒不再复制 HBV-DNA – 急性病毒复制，比HBeAg更准确；主要用于监测治疗反应 血清学检测的临床意义 HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 临床意义 * * A 病毒性肝炎 Hepatitis Virus 肠道传播 肠道外传播 F, TTV ? 其它 E NANB B D C 病毒性肝炎- 背景  传染源 粪便 血液/ 血源性物质/ 体液 血液/ 血源性物质/ 体液 血液/ 血源性物质/ 体液 粪便 传播途径 粪-口 经皮肤/ 经粘膜 经皮肤/ 经粘膜 经皮肤/ 经粘膜 粪-口 慢性感染 否 是 是 是 否 病毒性肝炎类型 A B C D E 基因组类型 ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNA Hepatitis B Virus 高 中等 低/不能检出 血液 精液 尿 血清 阴道分泌物 粪便 伤口渗出物 唾液 汗液 泪液 乳汁 各种体液中HBV的浓度 血源性传播 输血、注射、外科和牙科手术、针刺等 剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等 母婴垂直传播 宫内传播 分娩时微小皮损处传播 产后母婴密切接触 性传播 HBV 传播途径 急性或慢性感染(大三阳) + - + - + + + + 乙肝后期或慢性感染(小三阳) - - + + - - - 潜伏期或急性乙肝早期 - - + + + 痊愈或恢复期,有免疫力 - - - - - + + + - - 痊愈,有免疫力 疫苗接种或曾经感染过,有免疫力 3 dsDNA(double srraind DNA)双链DNA(HBV:双链环状DNA) ssRNA(single straind RNA): 单链RNA(HAV:单股正链RNA; HCV:单股正链RNA; HDV: 单股负链RNA; HEV ) 乙型肝炎是5种病毒性肝炎感染人数最多的一种. 小球形颗粒、管形颗粒、Dane颗粒 2 2 2 性传播 肠道外传播（血液传播） 母婴垂直传播 - Mothers who are HBeAg positive are much more likely to transmit to their offspring than those who are not. Perinatal transmissi