蚯蚓细胞色素P450生物标记物方法研究.pdf

第 27 卷第 8 期 环 　　境 　　科 　　学 Vol. 27 ,No. 8 2006 年 8 月 ENV IRONMEN TAL SCIENCE Aug. ,2006 蚯蚓细胞色素 P450 生物标记物方法研究 张薇1 ,2 , 宋玉芳1 ,3 , 孙铁珩1 ,3 ,周启星1 ,3 , 刘淼1 ,2 ,宋雪英1 ,2 ( 1 中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验室 ,沈阳 　110016 ; 2 中国科学院研究生院 ,北京 　100039 ; 3 沈阳大学沈阳环境工程重点实验室 ,沈阳 　110041) ( ) ( ) 摘要 : 以蚯蚓 Eisenia f etida 为试验动物 ,通过强化预处理 盐水洗脱 、改变离心力和溶解微粒体膜等实验 ,建立了蚯蚓细胞 ( ) 色素 P450 含量的定性、定量测定方法. 在此基础上 , 以多环芳烃 菲 为供试外源污染物 ,分别以滤纸接触法和土壤投加法 ,进 行了蚯蚓细胞色素 P450 含量与菲污染诱导的量效关系试验. 结果表明 ,增加和调整离心力 ,加入增溶剂等方法 ,可有效去除 ( ) 干扰 ,使蚯蚓微粒体样品的 450 峰值由完全被干扰掩盖 在 455～457nm 处滞后出现 ,转变为在 450nm ±1nm 达到最大值. 滤 ( - 6 - 5 - 4 - 3 - 2 - 1 ) ( - 1 ) 纸接触试验 10 ,10 ,10 ,10 和 10 mg ·mL 和土壤染毒试验 1 ,2 ,4 ,8 mg ·kg 均表明 ,蚯蚓体内 P450 含量与菲 ( ) ( ) 浓度存在量效关系. 对土壤染毒不同诱导时间 1 ,3 ,7 ,14 ,28d 的测定结果表明 ,不同浓度的菲对蚯蚓毒性为诱导刺激 7d 效 ( ) ( ) 应和诱导抑制 14d 和 28d 效应 ,导致蚯蚓体内 P450 总量分别为对照组的 0 99～141 倍及 0 77～0 88 倍 p 0 05 . 蚯蚓细 胞色素 P450 含量测定方法具有简单、快速、低耗、敏感的优点 ,是适合于土壤低剂量污染暴露毒性诊断的生物标记物指标. 关键词 :赤子爱胜蚓 ;细胞色素 P450 ;生物标记物 ;土壤污染 ;剂量效应 中图分类号:X1715 　文献标识码 :A 　文章编号 (2006) Establishment of Method for Cytochrome P450 of Earthworms