花生胚小叶的离体再生及筛选压力选择.pdfVIP

２０１２年６月 中国油料作物学报 ２０１２，３４（３）：３１６－３２０ Ｃｈｉｎｅｓｅｊｏｕｒｎａｌｏｆｏｉｌｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅｓ 花生胚小叶的离体再生及筛选压力选择 张月婷，桂大萍，黄家权，雷　永，晏立英，姜慧芳，廖伯寿 （中国农业科学院油料作物研究所，农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室，湖北 武汉４３００６２） 　　摘要：以花生胚小叶为外植体优化离体再生条件，通过对再生苗进行筛选，为外源基因的遗传转化提供实验依 据。研究表明，不同基因型胚小叶的再生能力差异显著，在供试基因型中以中花８号不定芽诱导率和成苗率最高， 且外植体状态最好。中花８号胚小叶再生的最佳诱导培养基为ＭＳＢ（ＭＳ无机盐＋Ｂ有机成分）＋６－ＢＡ（４．５ｍｇ／ ５ Ｌ）＋ＮＡＡ（１ｍｇ／Ｌ）＋ＡｇＮＯ（２ｍｇ／Ｌ），最佳诱导培养时间为２１ｄ。对中花８号再生苗进行筛选浓度实验，草丁膦 ３ （ＰＰＴ）为２０ｍｇ／Ｌ时，可筛选出抗性苗；３００ｍｇ／Ｌ的卡那霉素（Ｋｍ）可用于较小幼苗筛选，而对较大幼苗则需将 Ｋｍ 的浓度提高至４００ｍｇ／Ｌ以上。 关键词：花生；胚小叶；植株再生；筛选浓度；卡那霉素；草丁磷 中图分类号：Ｓ５６５．２０３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００７－９０８４（２０１２）０３－０３１６－０５ Ｉｎｖｉｔｒｏｐｌａｎｔｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｆｒｏｍｌｅａｆｌｅｔｏｆｐｅａｎｕｔａｎｄｉｔｓｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｏｓｅｌｅｃｔｉｏｎａｇｅｎｔ ＺＨＡＮＧＹｕｅ－ｔｉｎｇ，ＧＵＩＤａ－ｐｉｎｇ，ＨＵＡＮＧＪｉａ－ｑｕａｎ，  ＬＥＩＹｏｎｇ，ＹＡＮＬｉ－ｙｉｎｇ，ＪＩＡＮＧＨｕｉ－ｆａｎｇ，ＬＩＡＯＢｏ－ｓｈｏｕ （ＯｉｌＣｒｏｐｓＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ， ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆＯｉｌＣｒｏｐｓ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｗｕｈａｎ４３００６２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｄｅｖｅｌｏｐａｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍｆｏｒｐｅａｎｕｔｌｅａｆｌｅｔ，ｔｈｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｗａｓｏｐｔｉ ｍｉｚｅｄａｎｄｐｌａｎｔｌｅｔｓｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅａｇｅｎｔｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｎｐｌａｎｔｒｅｇｅｎ ｅｒａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｅａｎｕｔｇｅｎｏｔｙｐｅｓ，ａｎｄＺｈｏｎｇｈｕａ８ｗａｓｍｏｒｅｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｐｌａｎｔｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．ＭＳＢ（ＭＳ ｍｉｎｅｒａｌｓａｌｔａｎｄＢｏｒｇａｎｉｃｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）＋６－ＢＡ４．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＡｇＮＯ２ｍｇ／Ｌｗａｓｔｈｅｂｅｓｔｉｎｄｕｃｔｉｏｎｍｅ ５ ３ ｄｉｕｍｆｏｒＺｈｏｎｇｈｕａ８ｌｅａｆｌｅｔｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓ２１ｄ．Ｇｌｕｆｏｓｉｎａｔｅａｍｍｏｎｉｕｍ（ＰＰＴ，２０ｍｇ／Ｌ） ｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｆｏｒｓｅｌｅｃｔｉｎｇＺｈｏｎｇｈｕａ８ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｐｌａｎｔｌｅｔｓ，３００ｍｇ／Ｌｋａｎａｍｙｃｉｎ（Ｋｍ）ｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｆｏｒｓｅｌｅｃ ｔｉｏｎｏｆｓｍａｌｌｓｅｅｄｌｉｎｇｓａｎｄｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｂｏｖｅ４００ｍｇ／Ｌｗｏｕｌｄｂｅｍｏｒｅｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｓｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆｌａｒｇｅｒｓｅｅｄｌｉｎｇ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＡｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａＬ．；