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现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2014, Vol.30, No.7
出芽短梗霉发酵生产聚苹果酸的代谢通量及
关键酶活性分析
1，2 1 1 1 2
乔长晟 ，郑志达 ，孟迪 ，宋玉民 ，盖丽丰
（1.天津科技大学工业微生物教育部重点实验室，天津 300457）
(2.天津北洋百川生物技术有限公司，天津 300457）
摘要：野生型出芽短梗霉菌株TKPM00006 及其诱变菌株CGMCC30007 在相同条件下，使用5 L 罐进行聚苹果酸发酵，分析这
2 株菌在相同发酵状态下发酵中后期代谢网络的代谢流分布和关键酶活变化，对出芽短梗霉合成聚苹果酸的机理进行探究。结果表明，
菌株TKPM00006 和菌株CGMCC30007 的菌体生长情况相似，但产酸量分别为20.54 g/L 和30.2 g/L。.通过代谢通量分析及关键酶活
性的测定可知，丙酮酸羧化途径及乙醛酸途径是PMLA 合成的主要途径，TCA 循环途径在发酵后期比较弱，该结论通过添加代谢抑
制剂及中间代谢物实验加以证明。酶活分析同时还证明了高产菌株比出发菌株的PMLA 合成能力强主要是因为丙酮酸羧化途径的加
强。根据实验分析可在丙酮酸节点进行靶点改造或通过发酵调控改变丙酮酸节点处碳架的分配，通过加强丙酮酸羧化途径来减少因副
产物的生产而造成的碳架流失，达到增加聚苹果酸生物合成的目的。
关键字：出芽短梗霉；聚苹果酸；代谢流分析；酶活分析
文章篇号：1673-9078(2014)7-74-80
Metabolic Flux Analysis and Key Enzymes Activities Determination for
the Production of Poly Malic Acid using Aureobasidium pullulans
1,2 1 1 1 2
QIAO Chang-sheng , ZHENG Zhi-da , MENG Di , SONG Yu-min , GE Li-feng
(1.Key Laboratory of Industrial Microbiology, Ministry of Education, College of Biotechnology, Tianjin University of
Science and Technology, Tianjin 300457, China) (2.Tianjin Peiyang Biotrans Co., Ltd, Tianjin 300457, China)
Abstract: In this paper, metabolic flux and enzyme activity analysis for wild type Aureobasidium pullulans TKPM00006 and its mutant
strain CGMCC3337 was conducted in 5 L bioreactor in the same conditions. The mechanism of biosynthesis of PMLA using Aureobasidium
pullulans was investigated. The results showed that the biomasses in the two strains during the fermentation process were almost the same, but
the accumulated yield was 20.54 g/L and 30.2 g/L, respectively. Through
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