微生物发酵设备总结解析.doc

(名词解释 10x1.5=15填空：20x1=20 图注题1x10=10 问答题5x8=40 综合题1x15=15) 1.微生物工程的工业生产水平的决定要素：①生产菌种的性能②发酵及提纯工艺条件③生产设备。其中第一步也就是优良菌种是最重要的。 2.一般菌种分离纯化、筛选菌种的一般步骤：标本采集→标本材料的预处理→富集培养→菌种初筛→菌种复筛→性能鉴定→菌种保藏。 标本采集（要求） 来源广泛的天然材料。 已适应相当苛刻的环境压力的微生物类群 更新的生态环境有待开发 标本材料的预处理：（方法） 物理方法：加热、膜过滤、离心等 化学方法：加碳酸钙提高pH值等。 诱饵法：将固体基质加到待检的土壤或水中，待其菌落长成后再铺平板。 富集培养（名词解释）：指从微生物混合群开始,对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法。 3.自然选育、诱变选育、抗噬菌体菌种的选育、杂种育种、原生质体融合技术、基因工程技术等都是被用于优良生产菌种的选育方法（填空） 自然选育（名词解释）：不经人工处理，利用微生物的自然突变 进行菌种选育的过程。 诱变选育（名词解释）： 杂种育种（名词解释）：将不同菌株的遗传物质进行交换、重组，使不同菌株的优良性状集中在重组体中，得到具有新性状的菌株。 原生质体融合技术（名词解释）：将遗传性状不同的两种菌(包括种间、种内及属间)融合为一个新细胞的技术。即实现遗传重组。 基因工程技术（名词解释）：将一个含有目的基因DNA片段经体外操作与载体连接，并转入一受体细胞（通常多为细菌），使之扩增、表达的操作过程。 4.常用的各种诱变剂 诱变育种的方法和步骤。 基本方法：诱变 + 筛选 诱变剂：化学诱变剂、物理诱变剂、生物诱变剂 诱变育种一般包括诱变和筛选两个部分。诱变部分成功的关键包括出发菌株的选择、诱变剂种类和剂量的选择，以及合理的使用方法。筛选部分包括出筛和复筛来测定菌种的生产能力。 诱变育种的基本过程：出发菌株的选择→制备菌悬液→诱变处理→筛选→保藏和扩大试验。 5.原生质体融合技术的主要步骤有哪些？（）解释各步骤 选择亲株、原生质体的制备、原生质体的融合、原生质体再生和融合子的筛选骤 ①选择亲株：1.遗传性状稳定且具有优势互补的两个亲株 2.了能明确检测到融合子，参与融合的亲株一般都需要带有可以识别的遗传标记，如营养缺陷型或抗药性等 ②原生质体的制备：1.细胞壁是制备原生质体的关键 2培养基中添加甘氨酸，可以使菌体较容易被酶解；3菌体生长阶段添加蔗糖也能提高细胞壁对溶菌酶的敏感性4菌体生长对数期加入适量青霉素，就能使细胞对溶菌酶更敏感5龄：对数生长中期细胞的细胞壁中肽聚糖含量很低，对溶菌酶敏感。6般是将原生质体放在高渗的环境中以维持它的稳定性 ③原生质体的融合：1.二醇（PEG）能有效地促进原生质体融合2.般PEG的使用浓度范围在25-40% ④原生质体再生：1.使原生质体重新长出细胞壁，恢复完整的细胞形态结构； 2.不同微生物的原生质体的最适再生条件不同，最重要的一个共同点是都需要高渗透压。 ⑤融合子的筛选：1.通过两亲株遗传标记的互补而得以识别 2.如两亲株的遗传标记分别为营养缺陷型A+B-和A-B+，融合重组子应是A+B+或A-B-。 6.常用菌种保藏的方法（）填空。 1、斜面冰箱保藏法2、土管保藏法 3、菌丝速冻法4、石蜡油封存法5、真空冷冻干燥保藏法6、氮超低温保藏法 7.培养基的主要成分有哪些？（填空和问答题）碳源、氮源、无机盐、微量元素、特殊生长因子、促进剂、前体、水等几大类。 碳源：糖类、油脂、有机酸、低碳醇等。 氮源：1、无机氮源（铵盐、硝酸盐和氨水）2、有机氮源（尿素、酵母粉） 无机盐：磷酸盐、硫酸镁、钾盐等。 微量元素：（锰、铁） 特殊生长因子：生物素、氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等 促进剂：巴比妥 前体：青霉素、苯乙酸。 水： 前体（名词解释）：某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程结合到产物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，却能提高产物的产量的一类小分子物质。 促进剂（名词解释）：是一类刺激因子，这类物质的加入或可以影响微生物的正常代谢，或促进中间代谢产物的积累，或提高次级代谢产物的产量。 抑制剂（名词解释）：可以抑制某些代谢途径的进行，同时刺激另一代谢途径，以致可以改变微生物的代谢途径的添加剂。 根据物理性状不同，分为：液体培养基、体培养基、固体培养基 按照培养基的组成成分，有合成培养基和天然培养基。 按照培养基的状态可分，固体培养基、半体培养基、液体培养基。 按用途将培养基分为孢子培养基、种子培养基、发酵培养基。 （根据来源不同，分为：天然培养基、合成培养基、半合成培养基。） 孢子培养基（名词解释）：供菌种繁殖孢子用的培养基。制备