DB21T 2734.1-2017 病菌PCR 分型诊断方法 第1部分：大肠杆菌PCR 检测方法.pdf

ICS 11.220 B 41 DB21 辽 宁 省 地 方 标 准 DB21/T 2734.1—2017 病菌 PCR 分型诊断方法 第 1 部分：大肠杆菌 PCR 检测方法 Method of PCR typing diagnosis for bacterial Part1 Method of PCR detection for Escherichia coli ： 2017 - 02 - 23 发布 2017 - 03 - 23 实施 辽宁省质量技术监督局 发 布 DB21/T 2734.1—2017 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 缩略语 1 4 原理 1 5 仪器和器材 1 6 试剂和材料 1 7 操作步骤 2 7.1 样品的采集、前处理、存放与运输 2 7.1.1 采样注意事项 2 7.1.2 采样工具 2 7.1.3 内脏样品的采集与前处理 2 7.1.4 内容物的采集与前处理 2 7.1.5 粪便的采集与前处理 2 7.1.6 血液 2 7.1.7 大肠杆菌纯培养物 3 7.1.8 保存与运输 3 7.2 PCR 检测 3 7.2.1 DNA 提取 3 7.2.2 PCR 3 7.2.2.2 PCR 反应条件 3 7.2.2.3 电泳 4 8 试验成立的条件 4 9 结果判定 4 附录A （规范性附录） 试剂配制 5 A.1 电泳缓冲液 （50 倍） 5 A.1.1 0.5mol/L 乙二铵四乙酸二钠 （EDTA）溶液 （pH 8.0） 5 A.1.2 TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50倍) 5 A.2 1%琼脂糖凝胶 5 I DB21/T 2734.1—2017 前 言 标准 《病菌 PCR 分型诊断方法》按照 GB/T