液相色谱操作基础.pdf

液相色谱仪使用与保养 液相色谱仪使用与保养 吕运开 吕运开 内 容 内 容 第一节 岛津LC-20A型HPLC操作规程 第二节 流动相配制与使用 第三节 样品注意事项 第四节 色谱柱使用、保存与评价 第五节 高效液相色谱日常简易保养及维护 第六节 高效液相色谱仪检定规程 第一节 第一节 岛津LC-20A型HPLC操作规程 岛津LC-20A型HPLC操作规程 SPD-20A 贮液瓶 UV检测器 CTO-20A柱温箱 7725i 手动 进 样阀 CBM-20A 系统控制器 LC-20AT RF-10A XL 荧 光 A泵 B泵 检测器 一、 系统组成 一、 系统组成 本系统由2个LC-20AT溶剂输送泵、 Rheodyne 7725i 手动进样阀、SPD-20A紫外-可见检测器、 RF-10AXL荧光检测器，色谱数据工作站和电脑等 组成，另外还包括打印机。 7725i 手动进样阀 7725i 手动进样阀  手柄位进样(Load)位置时，样品经微量进样针从进样孔注射进定 量环，定量环充满后，多余样品从放空孔排出；  将手柄转动至进样(Inject)位置时，阀与液相流路接通，由泵输 送的流动相冲洗定量环，推动样品进入液相分析柱进行分析。 手动进样阀使用注意事项 手动进样阀使用注意事项  调至LOAD档。注射器针头外侧紧贴进样器密封管内侧，插入到 针道中。通过密封垫的最后2-3毫米可能会感觉到紧然后在接触 到定子的位置停下。载入样品。  将注射器留在里面然后调至Inject档，然后拔出。  注意：手柄转动要快，处于Load和Inject之间时，由于暂时堵住 了流路，流路中压力骤增，再转到进样位，过高的压力在柱头上 引起损坏。  样品环中样品量不应多于环体积的一半。例如，在20微升环中加 不多于10微升的样品。样品量若超过一半，一些样品会丛孔6 中 流失。这是由于层流液体黏度的影响，样品在环中心以相对于环 壁二倍的速率流下  完全填充环法：填入样品环至少二至五倍的样品量，推荐采用 100 ul的平头进样针配合20 ul满环进样 二、 准备 二、 准备 1 、准备所需的流动相、甲醇、甲醇水，用合适的 0.45 μm滤膜过滤，超声脱气20min 。（溶液必须混合 均匀） 2、 配制样品和标准溶液，用合适的0.45 μm滤膜过滤。 3 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连 接正常。 三、 开机与关机 开机顺序：接通电源，依次开启电源、 泵、检测器 ，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显 示器、主机，最后打开色谱工作站。开机用10-20倍 柱体积的甲醇平衡色谱柱 关机顺序：经彻底冲洗后，把流速设为零，先退出 工作站软件，再依次关闭系统控制器、检测器、自 动进样器、柱温箱、泵。 四、 排气泡