标本片参考资料 .doc

表9-5 根及根茎类中药粉末显微特征比较 项 目 根 类 根 茎 类 导 管 较粗大，以具缘纹孔、网纹、螺纹导管为多见 以环纹(单子叶植物)、螺纹、网纹或具缘纹孔导管为多见(蕨类只有管胞) 纤 维石 细 胞淀 粉 粒针 晶鳞叶组织内皮层细胞 可见(较柔软的根类少见)少见细小较少无有(单子叶植物药多见) 常见多见较大较多(主要是单子叶植物的根茎)有无 二、显微标本片的制备 ???? 字体 [大] ??[中]?? [小] 在进行显微鉴定时，应首先选择具有代表性的检品，制作显微标本片，然后在显微镜下进行观察。 显微标本片根据制作方法和保存的需要，分为半永久制片、永久制片和临时制片3大类。半永久制片的封藏介质是半固体，可作暂时性保存;永久制片的封藏介质是固体，可作长期保存，但其制作费时，多用于特殊目的，如供显微摄影和核对标本等应用;临时制片的封藏介质是流动性液体，容易损坏，不耐久藏，但制作简单、迅速，适用于一般观察及进行显微化学反应，在中药鉴定工作中应用最多。 在鉴定工作中，由于观察的目的不同，对不同检品采取的制片方法也不同，所以又分切片标本片(包括横切片、纵切片，纵切片又包括切向纵切片和径向纵切片)、解离组织标本片、表面标本片、粉末标本片和磨片5种。其中横切片多用于观察组织的排列特征;纵切片多用于观察茎、木类中药的某些细胞组织，如射线的特征;解离组织片用于观察某些细胞的形状，如纤维、石细胞等;表面片多用于观察叶、花、全草、果实和种子等的表面特征，一般取某一部分制片;粉末片多用于观察组织碎片、细胞及后含物或某些中药颗粒的特征;磨片用于坚硬药材如骨类、贝壳类及矿石的显微特征观察。各类标本片的制作方法如下： 切片标本片的制作就是将药材切成极薄的横切片或纵切片，一般片厚为7～20μm，将其放在载玻片上，封藏在适宜的介质中，必要时可将切片先进行透化或染色等处理，然后封藏。按切片的手段不同可分为2大类：即机器切片法和徒手切片法。机器切片法按材料的包埋与否主要有滑走切片法、石蜡制片法和火棉胶制片法。一般多用徒手切片法及滑走切片法，石蜡制片法和火棉胶制片法因操作时间较长，主要用作永久制片。 1.徒手切片法 是较常用而且比较简便的基本切片方法，制成的切片可保持细胞和后含物的原有形态，便于进行各种显微化学反应，但需要有较熟练的操作技术。 (1)材料的预处理：将新鲜或湿润后的干药材洗净，切成适当大小的块或段，一般以宽不超过1cm，长不超过3cm为宜;较坚硬的药材则以宽为0.5cm为宜，切面应削平。质地软硬适中的药材可以直接进行切片;质地坚硬的药材则须先使其软化才能切片。常用的软化方法是将材料放入吸湿器中软化，一般可采用玻璃质干燥器在其中放入含0.5%苯酚的水而成，使用时将需软化的药材放在小玻璃皿中，然后置于干燥器中的横隔板上，密封，一般的药材在12～24h后均可吸湿软化，以供切片用。个别药材如软化后仍较硬，则可放入水中浸软或煮软，一般需120 20min左右。此外，对由于过于柔软而不便于切片的药材，可将其浸入70%～95%乙醇中，约20min后即可变得较硬;柔软而薄的叶、花等药材，不便于直接手持切片时，可用某些植物的茎髓(如通草等)剖成两半夹着切;细小的种子或果实，可试取软木塞1个或白橡皮1块，在一端切一窄缝，将药材嵌入其中切片，如仍不行，则可用树胶将药材粘贴在软木塞一端或取1小方块石蜡用烧红的解剖针在石蜡的一端烫开1个小孔，立即将材料放在孔中，石蜡凝固后即可供切片用。 (2)切片方法：用左手拇指、食指及中指紧压和抵住材料，材料上端不要超过3～4mm。右手执刀片，刀口向内并使刀刃与材料的切面平行，移动右臂使刀锋自左前方向右后方斜滑切削，即可得到薄片，注意切片时要保持材料平整，刀口轻轻压住材料，切时要用臂力而不用腕力，左手不动，并在材料和刀片上时时用水(用于坚实的材料)或稀乙醇(用于较柔软或含粘液的材料)使保持湿润，以防止材料干燥收缩和避免切出的薄片粘在刀片上不易取下。将切得的薄片用毛笔轻轻从刀上拂下，移至装有蒸馏水或稀乙醇的培养皿中，除去过厚的切片及夹持材料即得。 (3)选片：目选最薄而平整的切片，放在载玻片上，加水或稀乙醇1滴，在低倍镜下观察，判断切片在厚薄、特征的完整性和清洁性等方面是否符合要求。 (4)染色及封藏：徒手切片一般均不染色，而直接封藏在适宜的试剂中，如水合氯醛液、稀甘油或某种显微化学试剂等。如要制成半永久性标本片，可用稀甘油洗去水合氯醛液等，然后用溶化的甘油明胶封藏。若需染色并制成永久标本片，则应选取最好的切片，参照石蜡切片项下的染色及封片方法进行。 2.滑走切片法 是利用滑走切片机，将材料夹在上面直接进行切片。它是一种简单的机械操作，主要用于较坚硬药材的切片。切片机的主要