抗氧化测试-KnightScientific.PDF

抗 氧 化 测 试 测试样品清除自由基和其他氧化物的能力 ABEL™ 抗氧化测试 （PHOLASIN™ ） ABELTM 抗氧化测试试剂盒，是由Knight Scientific Limited公司研发的用于测试样品清除自 由基和其他氧化剂的能力。 如果样品已经暴露于自由基和/或氧化剂中，它的抗氧化剂的补充物 将会大大减少，致使样品在清除该检测中产生的自由基和氧化剂的能力降低。 这些化学发光测试试剂盒包含独特的发光蛋白 Pholasin，该蛋白可在自由基和特定氧化剂 存在的情况下发光。在测试条件下样品的抗氧化能力表达为在样品存在和不存在情况下的 Pholasin 蛋白产生光信号峰值的减少比例（和/或峰值的延迟时间）。抗氧化能力即为自由基和氧 化剂的清除能力，通过不同抗氧化剂的测试来分别测定。 ABELTM 抗氧化测试超氧化物和其他的自由基，非常适用于抗氧化剂的筛选，如抗坏血酸维 生素 C。 ABELTM 抗氧化测试卤素氧化物，如次氯酸以评估如白蛋白等的抗氧化性。 ABELTM抗氧化测试使用过氧亚硝基阴离子 (peroxynitrite, ONOO-) 作为一个总抗氧化能 力（total antioxidant capacity，TAC ）的测试，能够用于亲脂性的抗氧化物，如维生素E， 也可以用于亲水性抗氧化物如谷胱甘肽的筛选。 ABELTM抗氧化测试羟基自由基，是一个绝佳的分析多种材料的抗氧化能力的方法，包括植 物。 ABELTM抗氧化测试使用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶反应产生的超氧化物，可以很好地来定量超氧 化物水平和测试SOD （superoxide dismutase，超氧化物歧化酶）和SOD类似物的活性。 超氧化物和其他的自由基，卤素氧化物和羟基自由基测试时单个的闪光测试，在 10 到 30 秒钟内即可完成。过氧亚硝基阴离子分析最适合于大样本测试，一个 96 孔板可以在 20 到 60 分 钟内完成（决定于样品的抗氧化能力）。超氧化物的定量分析适合于 10 到 12 个样品在一块微孔 板上进行，在 10 到 20 分钟完成。所有的这些分析样品量只需要 5 到 50µl， 这依赖于分析的类 型和使用的仪器是管式的还是 96 孔板式的化学发光仪。可分析的典型的样品形式包括：血清， 分泌液，脑脊髓液，精液，肺腔液，水，其他的液体。试剂盒含有 Pholasin 和其他抗氧化测试所 必需的各种试剂。 ABELTM 抗氧化试剂盒对某些氧化剂有特效。就过氧亚硝基阴离子检测而言，其最适合进行 总抗氧化能力TAC 的测试，特别是对人、动物、组成成分和成品的检测。ABELTM 的TAC测试是 用ABELTM 超氧化物和其他自由基试剂测试的，其中含有专利的能产生超氧阴离子的溶液。 ABELTM超氧化物定量测试试剂盒含有黄嘌呤和黄嘌呤氧化物，能够产生已知量的超氧阴离子。 ABELTM 卤素抗氧化测试试剂盒中，氯胺-T能够释放出次氯酸可以作为次氯酸和次溴酸的模型，同 2 样也可以作为氯胺和溴胺（ bromamines ）的模型。过氧亚硝基阴离子试剂盒的SIN-1 （3-morpholinosydno nimine hydrochloride ）可同时释放超氧化物和一氧化氮，二者可形成过氧 亚硝基阴离子。 PHOLASINTM 的介绍 PholasinTM 是海洋岩生的生物发光软体动物-Pholas dactylus （普通的海笋）来源的发光蛋 白。Pholasin 自己不会发光，需要激发剂才行。激活的白细胞（或其他细胞）产生的自由基和其 他的反应氧可以激发PholasinTM 发光。PholasinTM 对于激活的白细胞具有超敏感性。 在以下物质存在时，PholasinTM 可以发光： • 自由基：超氧阴离子，单线氧，NO和可能的羟基自由基和/或过渡自由基； • 超氧化物：如次氯酸和次溴酸，氯胺，溴胺和过氧亚硝基阴离子； • 酶：过氧化物酶和特定的氧化酶。 自由基 自由基是含有未配对电子的原子的分子。如