应用柱前衍生化高效液相色谱法开辟了一种简单快速的dnj产生菌的.pdfVIP

微生物学通报 DEC 20, 2012, 39(12): 1762−1768 Microbiology China © 2012 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 应用柱前衍生化高效液相色谱法开辟了一种 简单、快速的DNJ 产生菌的筛选途径 * 曹小芳 王利强 白芳 白钢 (南开大学 药学院 天津市分子药物研究重点实验室 天津 300071) 摘 要: 【目的】应用柱前衍生化高效液相色谱法筛选产1-脱氧野尻霉素(DNJ)菌株, 并 对其进行系统鉴定。【方法】利用芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生化高效液相色谱法筛选 DNJ 产生菌; 通过形态特征、培养特征、生理生化特征以及 16S rRNA 序列相似性分析等 多项分类方法对DNJ 产生菌进行鉴定; 在 10 L 发酵罐水平进行发酵研究, 利用FMOC-Cl 柱前衍生化高效液相色谱法测定DNJ 含量。【结果】从80 株具有 α-糖苷酶抑制剂活性的 土壤放线菌中筛选得到一株DNJ 产生菌, 菌株编号为PW409, 初步确定为戈壁三素链霉 菌(Streptomyces gobitrici); 发酵研究表明, DNJ 为链霉菌PW409 的次级代谢产物, 发酵液 中DNJ 浓度为 12.1 mg/L。【结论】首次将FMOC-Cl 柱前衍生化高效液相色谱法应用于 DNJ 产生菌的筛选, 并首次报道从戈壁三素链霉菌发酵液中鉴定到DNJ 。 关键词: 1-脱氧野尻霉素, 戈壁三素链霉菌, 柱前衍生化, 多项分类 Efficient screening of 1-deoxynojirimycin producing strain by high performance liquid chromatography with pre-column derivatization * CAO Xiao-Fang WANG Li-Qiang BAI Fang BAI Gang (College of Pharmacy and Tianjin Key Laboratory of Molecular Drug Research, Nankai University , Tianjin 300071, China) Abstract: [Objective] To screen the 1-deoxynojirimycin producing strains by employing high 基金项目：国家自然科学基金项目(No.; 天津市应用基础及前沿技术研究计划项目(No. 10JCYBJC14300) *通讯作者：Tel: 86-22 : baifang1122@ 收稿日期：2012-03-19; 接受日期：2012-05-15 曹小芳等: 应用柱前衍生化高效液相色谱法开辟了一种简单、快速的 DNJ 产生菌的筛选途径 1763 performance liquid chromatography with pre-column derivatization and then perform phy- logenetic identification. [Methods] High per