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有机溶剂辅助封闭式电喷雾离子源的设计及其在痕量蛋白质-分析化学
第43卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 特约来稿 第10期
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2015年10月 ChineseJournal of Analytical Chemistry 1433~1438
藡蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥藡蕥蕥 DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.150646
特 约 来稿
藡蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥 藡
有机溶剂辅助封闭式电喷雾离子源的设计及其
在痕量蛋白质组样品分析中的应用
1,2 1 1 1 *1 3 1
朱旭东 摇 周 愿摇 梁振 摇 梁 玉摇 张丽华 摇 朱一心摇 张玉奎
1(中国科学院大连化学物理研究所,中科院分离分析化学重点实验室,大连 116023)
2 3
(中国科学院大学,北京 100049)摇 摇 (浙江好创生物技术有限公司,杭州311121)
摘摇 要摇 将康达效应应用于电喷雾离子源,设计了气氛可调康达效应电喷雾离子源(Coanda effect electrospray
ionization source,CEESI)。 考察了不同饱和蒸气压、不同极性的有机溶剂对标准肽段在质谱上信号响应的影
响。 结果表明,辅助气中添加乙醇后,标准肽段质谱信号提高约1000倍,而且对于1 ng BSA酶解产物,蛋白
序列覆盖率提高约10%。 在最佳条件下,采用nano鄄HPLC鄄CEESI鄄LTQXL MS系统,实现了6,10,20 和50 ng
HeLa细胞全提蛋白质酶解产物的定性分析,与常用的开放式nano鄄ESI相比,肽段和蛋白质的可鉴定数目分别
提高20% ~360%和20% ~200%。 本研究表明,采用CEESI源有利于痕量蛋白质组样品的高灵敏度分析。
关键词摇 康达效应;电喷雾离子源;蛋白质组;痕量分析
1摇 引摇 言
[1,2]
高效液相色谱鄄电喷雾离子化质谱(HPLC鄄ESI MS)技术已被广泛应用于蛋白质组样品分析 。 由
于蛋白质组样品具有组成复杂、蛋白含量动态范围宽、物理化学性质各异等特点,因此对分析方法的灵
敏度提出了越来越高的要求。 提高ESI过程的离子化效率、降低离子间相互抑制作用已成为一种有效
[3]
途径 。 众所周知,当HPLC 的流速降低至纳升级时,电喷雾可产生更小的雾滴,离子化效率得到明显
[4] [5,6]
改善 ,同时离子抑制和基质效应也会被显著抑制 。 因此,纳喷离子源已被广泛应用于蛋白质组学
[1,2]
样品分析 。
在改善检测灵敏度的前提下,提高ESI源的喷雾稳定性也至关重要。 目前,最常用的开放式纳喷离
[7] [8]
子源容易受到外界环境的影响,会出现喷雾不稳定的情况 。 然而,封闭式电喷雾离子源 在喷针和
质谱采样锥之间的空腔形成低压,可获得稳定喷雾; 同时通过增加辅助气,如空气或氮气,可改善离子
传输效率。 根据文献报道[9~12] ,辅助气中添加气化的有机溶剂可以显著改变肽段电荷分布,并提高肽
[9]
段离子化效率。 Li等 在辅助气中添加醇类或羧酸类蒸汽,可将肽段的MS信号增强3 ~4倍,鉴定的
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